色谱条件：

流动相：

1、色谱柱：Morphling^TM Amino Acid 4.6*250mm 5µm

流动相A： 0.1mol/L醋酸钠溶液（pH 6.5）：乙睛＝93.0：7.0

配制方法：准确称取无水醋酸钠8.203g于1000mL水中，搅拌均匀，使之溶解，用冰醋酸或氢氧化钠溶液调pH值至6.50；准确量取配制好的三水合醋酸钠溶液930mL和乙腈70mL，混合均匀，抽滤过0.22µm滤膜；  

流动相B：水：乙腈＝20.0：80.0

配制方法：准确量取水200mL和乙腈800mL，混合均匀，抽滤过0.22µm滤膜；

梯度方法：

2. 梯度程序：

       流动相A： 0.1mol/L醋酸钠溶液（pH 6.50）：乙睛＝93：7

流动相B： 水：乙腈＝20：80

流速：1.0ml/min

柱　温：43℃

  波  长：254nm

  进样量：5μL

3、样品制备衍生过程。

精密量取对照溶液5ml，加入25ml量瓶中，加入0.1mol/L异硫氰酸苯酯的乙腈溶液2.5ml，1.0mol/L三乙胺的乙腈溶液2.5ml，摇匀，室温放置1小时后，加入50%乙腈水至刻度，摇匀，取10ml，加正己烷10ml，振摇，放置10分钟。取下层溶液，过滤，取续滤液，即得。

3、色谱图：

图1、样品衍生后

图2：取样品溶液1ml加50%乙腈水稀释1倍。（由于衍生试剂浓度过大造成样品测定过载，形成峰分叉，样品稀释1倍后测定）