技术服务 配体模拟激活性抗体制备
时间：2020-05-09 阅读：1181
技术简介
细胞信号转导是细胞功能组学研究的核心内容。而受体配体结合启动细胞信号活动是许多激活或抑制性信号通路关键的起始步骤。通过制备细胞表面信号受体的相关抗体，然后用抗体模拟受体的原配体细胞表面受体结合，从而启动细胞信号通路，这样的抗体我们称之为配体模拟激活性抗体。这其中经典的例子莫过于一些在肿瘤靶向治疗中使用的抗体药物，目前，临床上至少有11种单克隆抗体药物被认定为是以受体激活方式发挥功能的。
目前除了常规的兔、鼠多抗和鼠单抗杂交瘤细胞制备筛选方案，基于噬菌体展示技术，本公司目前还能够实现对新的受体激活抗体的发现，我们有常备的天然抗体库，也可以根据特定抗原的信息，依托*的原核或真核蛋白表达技术，制备免疫后噬菌体库，然后针对受体重组胞外区（ECD）进行特异性抗体筛选。经过噬菌体ELISA初筛的到的单链抗体，还可以进一步进行一些基于细胞实验的功能性筛选。公司目前已分离得到包括TNF受体超家族、CD28、CD40、PD1、CD137等在内的配体模拟型激活性抗体。
服务组合
服务项目 (Service Items) | 周期（周） Time(weeks) | 免疫库 immunized library | 天然库 naive library | 杂交瘤制备筛选 Hybridoma Screening | |||
多肽设计与合成 Peptide design & synthesis | 多肽设计 Peptide design | ~2 | 可选，免费 | ||||
多肽合成 Peptide synthesis | √ | √ | |||||
小分子或多肽偶联 conjugation | √ | √ | |||||
蛋白制备 Proteins preparation | cDNA合成 cDNA synthesis | 6~8 | √ | 另议，时间与价格均不包含在以下信息中 | |||
载体构建 Vector construction | √ | √ | |||||
蛋白表达与纯化 Protein expression & purification | √ | √ | |||||
免疫阶段 Immunization | 免疫动物 Immunized animals | ~8 | √ | √ | |||
ELISA检测 Elisa detection | √ | √ | |||||
细胞融合与筛选 Fusion & Screening | 1.5 | √ | |||||
亚克隆阶段 Subcloning | 1 | √ | |||||
腹水生产（2只大鼠） Ascites production (Injection on 2 mice) | 1 | √ | |||||
cDNA制备 cDNA preparation | 逆转录制备cDNA文库 prepare cDNA library by RT-PCR | ~1 | √ | ||||
cDNA 文库质检 cDNA library QC check | √ | ||||||
构建Fab抗体库 Fab library construction | VH与VL基因获得 obtained VH and VL genes | 10~15 | √ | ||||
构建初级抗体库 primary antibody library construction | √ | ||||||
构建Fab抗体库 Fab library construction | √ | ||||||
噬菌体筛选 phage screening | 噬菌体颗粒包装 phage particles package | 10~15 | √ | √ | |||
磁珠亲和筛选 magnetic beads affinity screening | √ | √ | |||||
阳性克隆回收基因测序 Recover positive clones and DNA sequencing | √ | √ | |||||
抗体表达 Antibody expression | 特异性双链基因合成与Fc基因桥接 synthetic of target phage gene and Fc gene | ~5 | √ | √ | |||
构建真核表达载体 Eukaryotic system expression plasmids construction | √ | √ | |||||
真核表达 Eukaryotic system expression | √ | √ | |||||
稳转细胞系构建 Stably transfected cell line construction | |||||||
纯化与检测 Purification and detection | 标签纯化 Tag affinity purification | ~1 | √ | √ | |||
亲和纯化 Affinity purification | √ | ||||||
特异性亲和纯化 Antigen specific affinity purification | √ | √ | |||||
总周期（月） Total lead time(months) | 7~9 | ||||||
注：
价格面议；
请慎重考虑周期事宜，以上时间仅为理想条件下短周期；