表面等离子共振技术实验步骤——艾柏森生物
时间:2024-08-22 阅读:258
表面等离子共振(SPR)技术实验步骤主要包括以下几个阶段:
配体的固定:首先需要将待测分子(配体)固定在传感器芯片表面。这通常通过共价偶联或物理吸附实现,偶联条件(如pH值)需要优化以确保配体的稳定性和活性 。
样品的准备:分析物(如蛋白质、小分子等)需要以适当浓度和体积准备,以确保能够与芯片表面的配体有效结合 。
样品进样:将含有分析物的溶液通过微流控系统流过传感器芯片表面,配体与分析物之间的相互作用会导致SPR角度的变化,这一变化被仪器实时监测并记录 。
数据采集:在分析物与配体结合及随后的解离过程中,仪器会记录SPR信号的变化,这些数据反映了分子间的相互作用特性 。
芯片再生:实验结束后,需要使用适当的溶液(如酸性或碱性溶液)清洗芯片,以去除残留的分析物,恢复芯片表面,为下一轮实验做准备 。
数据分析:通过分析软件处理实验过程中获取的SPR信号,可以计算出分子间的结合亲和力、动力学参数等,从而得到有关生物分子相互作用的详细信息 。
实验优化:根据实验结果调整样品浓度、流速等参数,以获得更准确的实验数据 。
SPR技术因其无需标记、实时监测、灵敏度高等特点,在药物筛选、蛋白质-蛋白质相互作用研究、抗体-抗原结合等领域具有广泛应用和重要价值 。
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