细胞破碎机的冷冻研磨技术讲解
时间:2020-12-12 阅读:533
细胞破碎有关冷冻研磨技术的说明:
细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植物和微生物由于具有较坚固的纤维素、半纤维素组成的细胞壁。几乎所有细菌的细胞壁都是由肽聚糖组成,它是难溶性的聚糖链,借助短肽交联而成的网状结构,包围在细胞周围,使细胞具有一定的形状和强度。破碎细菌的主要阻力是来自于肽聚糖的网状结构,其网结构的致密程度和强度取决于聚糖链上所存在的肽键的数量和其交联的程度。
细胞放在低温下冷冻(约-15℃℃),然后在室温中融化,反覆多次而达到破壁作用。
细胞破碎冷冻研磨的原理由于冷冻,一方面能使细胞膜的疏水键结构破裂,从而增加细胞的亲水性能,另一方面胞内水结晶,形成冰晶粒,引起细胞膨胀而破裂。对于细胞壁较脆弱的菌体,可采用此法。