探讨关于紫外分光光度计的常见问题你也来参与
时间:2021-11-24 阅读:1468
紫外可见分光光度计是分析测试实验室里常见的一种分析仪器,用于测定被测物质在一定波长照射下所产生的吸光度的大小,从而实现对物质进行定性或定量分析。在平时的日常教学及到企业调研时,发现在分光光度计使用问题上,使用者多多少少都存在一些疑惑或使用不规范的问题,下面就常见的一些问题进行讨论。
关于仪器的预热问题
在一般分光光度计的使用说明书上,要求仪器预热时间约20分钟;若是带微处理器的分光光度计,开机后仪器自动进入自检 (初始化 )状态,约需1O分钟左右。在分光光度计预热这个环节上,很多使用者或多或少存在问题,如开机只预热电路系统 (不调节波长、打开吸收池暗箱盖预热等)或认为初始化过程就是预热等等。
对带微处理器有自检功能的分光光度计,开机后仪器自检 (初始化)结束后,在测定窗口上,设置所需波长值,用一个吸收池装上纯净水置于光路上,调 “0000A”后,预热仪器,当仪器显示读数不再变化后即可进行测定。
对于紫外可见分光光度计,由于有双光源 (钨灯与氘灯), 为了延长灯的使用寿命,开机自检完成后可以关掉测定时不用的光源灯。
2关于波长准确度的检查与校正
日常在使用分光光度计时,是否要经常进行仪器波长准确度的检查 ?答案是否定的。当在日常测定中发现仪器测定灵敏度下降,这时才应进行波长准确度的检查,最简易的检查方法 (粗检 )是:仪器开机后,调节波长为 580nm,在吸收池座的通光道中插入一张白色卡片纸,若能观察到一长方形 的黄色光斑,说明波长准确度属正常范围,否则就应进行波长校正。
当仪器经过长途搬运、受过机械振动或更换光源灯泡后,必须进行波长准确度的检查与校正。粗检同上,其校正方法有:干涉滤光片或镨钕滤光片校正法、利用氘灯的特征发射线校正法。具体步骤可参考仪器使用说明书。
3关于吸收池的使用问题
按照吸收池使用的基本顺序分说如下:
(1)吸收池的润洗
吸收池装液前必须用待装溶液润洗 2~3遍,润洗前是否要用纯水先润洗一遍呢?这可看具体情况区别对待。
如果初次用干的吸收池装待测液 (特别是有色溶液)时,从维护保养吸收池的角度讲,为减小其干玻面对颜色的吸附能力,便于用后吸收池的清洗,建议先用纯水润洗一遍,再用待装溶液润洗 2~3遍;若后再用此吸收池装浓度相近或更高浓度的溶液 (如从小到大测定标准系列溶液的吸光度)时,可直接用待装溶液润洗2~3遍即可。
标准曲线法定量时,如果是先测定标准系列溶液的吸光度,当测到样品溶液时,由于测定的样品溶液浓度比最后一个标准溶液的浓度低或不可知时,建议先用纯水润洗一遍,再用待装溶液润洗 2~3遍。
(2)吸收池的装液、擦拭与放置 吸收池润洗完成后注入待测溶液至池高的 2/3~3/4处。
(3)吸收池成套性检验及处理 新吸收池或吸收池使用一段时间后都必须进行成套性检验.