一、概述

细胞尺寸在生物研究中至关重要。越来越多研究揭示了细胞大小和表型特征（如干性特征、增殖能力和代谢状态）之间复杂的相关性。在生物制造等应用的工艺流程中，细胞大小是评估细胞治疗中分批培养或原材料细胞是否健康的关键指标。因此，自动细胞计数中可靠的细胞大小测定已成为重要的结果。

点成LUNA-FX7细胞计数仪可精确提供细胞大小的数据。除了所有点成LUNA系列细胞计数仪共有的标准细胞尺寸门控功能外，点成LUNA-FX7计数输出还包括与每个细胞活力状态结合的尺寸测定。此外，点成LUNA-FX7具有多种方法来根据计数期间和计数后的大小对细胞群进行分析和分类。在此，我们展示了点成LUNA-FX7在测量细胞尺寸上的准确性和可靠性及其精确的尺寸门控功能。为了评估确定细胞大小的准确性，在明场总细胞计数模式下对六种不同的NIST可追踪粒度标准品和两种细胞系AsPC-1(胰腺癌)和DLD-1(结肠癌)进行了计数。

二、实验过程

1、精确测量各种粒径

六种不同的NIST可追踪粒径标准品(10-46 μm)在点成LUNA-FX7的明场总细胞计数模式下进行计数。测定粒径的准确度为96.7%以上。相反，市面上大多细胞计数仪对于10 μm或更小和50 μm及更大的颗粒则不准确。

NIST可追踪粒度标准的尺寸测定。

(A-F)图像显示了标记良好的颗粒，表明颗粒直径尺寸的精确测量。

(G)该表显示了LUNA-FX7™和竞争对手计数器的测量颗粒尺寸和尺寸测量精度。

2、混合条件下目标尺寸颗粒的计数

为了评估点成LUNA-FX7中尺寸测量的精确性，我们准备了四种不同比例的NIST可追踪粒径标准品（~10 μm、20 μm、40 μm和60 μm）的混合物。最初，我们对最小细胞尺寸值为3 μm和最大细胞尺寸值为60 μm的混合颗粒进行计数，该值是根据默认协议进行修改的。计数后，生成细胞浓度与细胞大小的直方图，并且NIST标准已正确分类。

精确的尺寸测定。

(A) 图像显示了标记良好的各种尺寸的颗粒。

(B-C)直方图指示NIST颗粒按尺寸的准确分布。

执行选定的尺寸门控，生成适合目标尺寸的标签，尺寸测量的准确度超过96.2%。此外，尺寸门控可以轻松应用于点成LUNA-FX7，通过计数前预设的协议，通过计数后立即调整直方图，或利用具有不同大小参数的协议重新分析存储的计数数据。

LUNA-FX7™中特定尺寸的门控。

标记的图像和直方图显示，目标尺寸的颗粒（以橙色表示）通过门控进行了集中、选择性和排他性的检测。

3、细胞系的计数和尺寸门控应用

最后，我们计数了两种不同大小范围的细胞系：AsPC-1（胰腺癌）和DLD-1（结肠癌）。健康的AsPC-1 细胞的尺寸范围为8 - 40 µm，而健康的DLD-1细胞的尺寸范围预计较窄，为10 - 20 µm。LUNA-FX7™ 准确捕获两个种群的整个大小范围。

AsPC-1和DLD-1细胞的细胞计数和大小测定。

应用AsPC-1 (A-C)和DLD-1 (D-F)细胞系来确认不同尺寸混合的计数性能。

4、结论

点成LUNA-FX7™有多种方法来测量、区分和确定细胞群的大小。点成LUNA-FX7™具有计数期间和计数后预定义大小门控选项，可灵活评估细胞群的健康状况和质量。此外，点成LUNA-FX7™的再分析功能可以对下游分析中保存的珍贵计数进行更广泛的评估。

三、点成生物细胞计数解决方案

作为实验室仪器集成商，点成生物始终致力于为客户提供先进的实验室设备解决方案。点成Aligned genetics为用户提供了先进的自动细胞计数仪设备，设备具有精确度和可重复度。如果您对点成Aligned genetics自动细胞计数仪设备感兴趣，欢迎随时与我们联系。