中文名称：油菜内标准HMG I/Y 基因探针法qPCR试剂盒
英文名称：Standard HMG I / Y gene probe qPCR kit in Brassica napus
货号：GOYP63791
规格：50次
运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为6个月。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

 

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
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小鼠成纤维细胞*培养基 100mLN-BOC-D-色氨醇质量规格：BR,>98%N-Boc-D-tryptophanol

MADB-106大鼠癌细胞 Breast cancer cells of MADB-106 rats 1640+10% FBSDL-苯甘氨醇 质量规格：>98%,BR2-Phenylglycinol

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CL-0404NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2(±)-Carnitinexy7nochloride混旋肉碱盐酸盐1克AR，99%

NRK-52E，大鼠肾细胞 Sars蛋白表达株，293sars181A细胞 NCI-H1703 [H1703](人肺癌细胞)钴标准溶液 Cobclt 7440-48-4

人前列腺癌低转移细胞株;PC-3M-2B4pxenidone尼酮5毫克IND

BSG Others Mouse 小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人细胞裂解液 (阳性对照) L-精酸100克

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小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-14'-羟基托莫西汀β-D-葡萄糖苷酸4'-Hydroxy Atomoxetine β-D-Glucuronide质量规格：美国进口

A9细胞，皮下结缔组织细胞 人肝星形细胞正常,LX-2细胞 CL-0088H4-IIE(大鼠肝癌细胞 )5×106cells/瓶×2阿托伐醌-d4Atovaquone-d4质量规格：美国进口

 技术特点：

油菜内标准HMG I/Y 基因探针法qPCR试剂盒1准确可靠，临床双盲对照试验＞1000例，结果与金标准测序法比对，结果一致性大于99%。
2高灵敏：可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速：整个检测流程只需3小时。
4简便：试剂盒提供预混好的试剂，使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性：双重特异性组成，保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需*配对，才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对，在延伸中产生荧光。