超声波细胞粉碎机细胞破碎提取叶绿素的具体步骤
时间:2017-10-18 阅读:2870
超声波细胞粉碎机是利用超声波在液体中的分散效应,使液体产生空化的作用,从而使液体中的固体颗粒或细胞组织破碎。
生物产业的发展,应用超声波细胞粉碎机所做的实验要求也随之提高,如对样品温度的测定、控制,低温冷却样品及整机的智能化程度的提高等等,都提出了新的要求。
超声波细胞粉碎机超声波细胞破碎提取叶绿素的具体步骤:
1.以离心或过滤水样,在抽滤器上装好乙酸纤维滤膜。倒人定量体积的水样进行抽滤,抽滤时负压不能过大(约为50kPa)。水样抽完后,继续抽1一2min,以减少滤膜上的水分。如需短期保存1一2d时,可放人普通冰箱冷冻,如需长期保存(30d),则应放人低温冰箱(一20℃)保存。
2.取出带有浮游植物的滤膜,在冰箱内低温干燥6一8h,用剪刀剪碎后,放人5ml或10ml离心管中,加人3一4ml90%丙酮,使碎片浸人液面下,放人超声波容器中用超声波对样品进行细胞破碎。(不同时间、不同频次来比较实验,便于找出*破碎时间、频次进行方法统一)。
3.将超声波进行细胞破碎的样品用离心机(3000一4000r/min)离心10min。将上清液倒人5ml或10ml容量瓶中。用90%的丙酮定容为5ml或10ml,摇匀。
4.将上清液在分光光度计上,用1cm光程的比色皿,分别读取750nm,663nm,645nm,630nm波长的吸光度,并以90%的丙酮作空白吸光度测定,对样品吸光度进行校正。