细胞培养板的加样和操作时需要注意的事项
时间:2021-10-23 阅读:2211
问:
96,24孔培养板或培养皿的盖子都很松,这样是方便了透气,但是细菌、霉菌等污染物会不会也随着溜进去呢?
答:
盖子很松,属于半开放培养,这样的目的是透气(实际上是为了使培养皿外的CO2能够与培养皿充分交换,维持培养基的pH值)。
凡事有利必有弊,这样当然增加了污染的可能性。此外这样还会使培养皿内的液体蒸发,这对于精确定量的药物来说就显得值得注意了。所以以下二条措施是必须的a培养箱内空气必须清洁(定期紫外线照,酒精擦洗,尽量少开关培养箱)b培养箱内的湿度必须始终保持为100%(培养箱内放置无菌蒸馏水的水槽)。
就好像培养皿,也是一个盖倒扣的容器,也不会污染。主要是因为盖子“L”型边缘产生气流负压的缘故,灰尘上面才附着有微生物,而气流携带的灰尘是无法通过产生负压的盖边缘的。而透气作用只是通过空气的扩散,不会产生气流,所以只会透气不会透菌。
问:
使用24孔板,在其中的某些孔中有操作(在超净台内),而其他孔中还有细胞要培养.我很担心这样会污染,不知道要注意什么?
答:
在超净台内如果操作规范的话应该可以的,我想你可以充分利用培养版的盖子,尽量只暴露要操作的孔,将其他孔用盖子盖起来。
使用前综合考虑一下,充分使用所有的孔;如果只需要使用少数的孔可以只用一边的,其余用盖子盖住,习惯于先用右侧的孔(右手加样方便)。
细胞培养板操作时用几块玻片把板子一侧垫高,不要把盖子全打开,一般没问题。