纯化磁珠的工作原理及纯化方法
时间：2023-03-22 阅读：3251
纯化磁珠是一种用于纯化生物样品的新型材料。它可以通过磁性吸附的方式快速、高效地从混杂的生物样品中分离出目标分子，如蛋白质、DNA或RNA等。
纯化磁珠的工作原理：
工作原理是基于磁性吸附技术。所谓磁性吸附，即是利用磁性微粒的磁性将目标分子吸附在磁珠表面，然后通过磁力将磁珠和吸附的分子分离出来，从而实现分离纯化的目的。
制备：
主要是由磁性微粒和作用于微粒表面的官能化试剂组成。通常采用配体、抗体、亲和素等官能化试剂对磁性微粒表面进行修饰，使其具有特异性识别和吸附目标分子的能力。
制备的方法有多种，最为常用的就是交联反应法。具体方法是将磁性微粒和交联剂混合，在水溶液中反应，生成交联磁性微粒，并用细胞孔径分离技术分离所得的交联磁性微粒，最后采用官能化试剂进行修饰。
纯化方法：
通常，纯化磁珠的纯化方法可以分为两种：手工操作和自动化操作。手工操作的方法较为简单，适用于小规模操作。自动化操作的方法则适用于大规模商业化生产。
手工操作的纯化方法一般包括以下步骤：
1.磁珠预处理：将磁珠分散在缓冲液中，加入磁性分离架（磁珠分离器）静置5-10分钟，磁性分离架和磁珠之间的吸附力会使磁珠沉降到磁性分离架的底部；
2.磁珠清洗：将磁性分离架和磁珠从混合物中移开，洗涤吸附在磁珠上的目标分子；
3.磁珠复苏：用纯的缓冲液重悬沉淀下来的磁珠，从而得到目标分子从磁珠中脱离的纯化产品。
在自动化操作的纯化方法中，通常采用毒理性较低、稳定性较高、流动性较好的磁珠，然后使用自动化纯化仪器对样品进行处理。这种方法具有大规模纯化的优点，但也需要专业人员进行操作和维护设备。