聚合酶链式反应(PCR)是现代分子生物学中的一项核心技术，它能够在短时间内大量扩增特定的DNA片段。而PCR管作为这一过程中的关键工具，其选用与维护直接关系到实验的成败。以下将详细探讨如何正确选用和维护PCR管，以确保PCR实验的顺利进行。
 

　　一、PCR管的选用
 

　　类型选择
 

　　单管：适合单个或少量样本的检测。
 

　　8联管与连盖8联管：8联管是常用的类型，一排有8个反应空间，能够灵活调整总数，操作便利。连盖8联管则每个管上都有独立的管盖，可按需选择，避免操作污染，方便加样。
 

　　12联管：一排有12个反应空间，操作灵活，性价比优于8联管。
 

　　体积选择
 

　　PCR管的体积主要分为0.1ml和0.2ml。具体使用哪种体积的管，需根据PCR仪设备来确定。0.1ml的PCR管比0.2ml的矮，若适配0.2ml PCR管的荧光PCR仪选择0.1ml的PCR管，可能导致设备热盖无法压住PCR管盖，运行过程中管盖崩开，试剂蒸发，形成气溶胶污染。相反，适配0.1ml PCR管的荧光PCR仪使用0.2ml的PCR管，可能损坏PCR仪。
 

　　材质与密封性
 

　　PCR管通常由耐高温的塑料材料(如聚丙烯PP或聚对苯二甲酸乙二酯PET)制成，具有光滑透明、无毒无味的特点。盖子则一般采用硅胶材料制成，以保持管内样品的高度密封性。
 

　　应选择来自可靠厂家的PCR管，如有必要，可以要求提供质量检验报告。
 

　　颜色选择
 

　　PCR管的管体颜色分为透明、磨砂和白色。在荧光定量PCR实验中，与透明管体相比，磨砂与白色管体因透光率降低，荧光损失减少，使更多信号被反射回荧光检测模块，增加信噪比。但需注意，不同品牌的荧光定量PCR仪适配不同颜色管体的PCR管。
 

　　二、PCR管的维护
 

　　预处理
 

　　在使用前，可以对PCR管进行预处理，如在高温下进行灭菌处理，去除可能存在的污染物。
 

　　正确装载
 

　　在装载样本和试剂时，确保每个孔位的液体量均匀一致，避免因液体量不均导致的实验误差。
 

　　避免交叉污染
 

　　在操作过程中，注意避免不同样本之间的交叉污染。使用一次性手套和干净的移液器吸头，确保实验的准确性。
 

　　及时清洗
 

　　在使用后，及时清洗PCR管，去除残留的试剂和样本。可以使用专用的PCR管清洗液，按照说明书进行操作。对于顽固污渍，可以使用超声波清洗机进行清洗。
 

　　干燥处理
 

　　清洗后的PCR管需要进行干燥处理。可以使用离心机进行离心干燥，或者自然晾干。避免使用热风枪等高温设备，以免损坏PCR管。
 

　　检查与筛选
 

　　在干燥后，仔细检查PCR管的完整性，剔除破损或变形的管子，确保其密封性和完整性。
 

　　正确存储
 

　　将清洗并干燥后的PCR管存放在干燥、阴凉的环境中，避免高温和阳光直射，以延长其使用寿命。
 

　　综上所述，正确选用和维护PCR管是确保PCR实验成功的关键。通过选择合适的类型、体积、材质和颜色，以及进行预处理、正确装载、及时清洗、干燥处理、检查筛选和正确存储等维护措施，可以有效提高PCR实验的准确性和成功率。