立柱安装方向

　　色谱柱安装应按同一方向连接，需按照上的方向指示连接，尽量避免接反！

　　常见的连接有两个主要问题。安装时，延长管接头长度过长，使螺纹变浅，导致密封不良和泄漏，进一步造成基线漂移或响应降低；反之，管道前段会出现死体积，导致峰形变宽，灵敏度降低。

　　理想的接头连接应具有以下特点：管道与界面之间无死体积；始终避免在超高压和高温下泄漏；优异的长期稳定性，防止管道滑动；使用方便。

　　管道的选择也很重要。分析液相系统常用的规格是内径为0.12和0.17mm的管道。更换管道时，首先确认当前管道规格，更换内径和长度相同的管道，否则更换前后的结果会不一致，因为管道的体积会影响柱外体积系统，从而影响峰形和保留时间。

　　反相柱活化平衡

　　1)首先，用甲醇或乙腈洗涤大约20个柱体积。

　　2)如果流动相含有缓冲盐，使用与流动相中初始比例相同比例的超纯水和有机相冲洗过渡液约20次柱体积，然后平衡并用含有缓冲盐的流动相冲洗大约柱体积的20倍或更多。

　　3）如果流动相不含缓冲盐，可以直接用流动相平衡柱子，大约柱体积的20倍或更多。

　　4)当基线和压力稳定后，根据连续注射结果的再现测试确定平衡是否*平衡。如果不够，可以延长流动相的平衡时间。

　　反相柱冲洗并保存

　　1)用50:50甲醇或乙腈与水的混合溶液冲洗20-30倍柱体积；

　　2）用纯甲醇或乙腈冲洗20-30倍柱体积；

　　3)存放前将柱端接头上的塞子密封严密，以防止填料变干。

　　反相柱清洗和再生

　　清洗或反冲反相时，用至少30倍柱体积的下列溶剂冲洗：

　　将与检测器断开，留出末端的管线，放入接液的烧杯中，用不含缓冲盐的流动相（水/有机相）冲洗，然后用100%有机相（甲醇和乙腈）检查压力是否恢复正常。如果没有，请继续下一步。

　　如果压力没有恢复正常，丢弃或考虑使用更强的条件进行清洁：75%乙腈/25%异丙醇、100%异丙醇、100%二氯甲烷、100%己烷。

　　值得注意的是，无论使用正己烷还是二氯甲烷，使用前或恢复使用反相流动相前都需要用异丙醇冲洗。

　　关于反吹

　　尽管不应轻易反吹，但当明确知道超压是由颗粒堵塞筛板或柱头污染补救措施引起时，反吹是有效的。反吹可以快速冲洗掉颗粒物。此外，它可以快速冲出柱顶以强力吸附污染物。反吹后，仍处于正向连接状态。但是，反吹也会带来负面影响。例如，它可能会导致柱床松动、保留时间的变化以及小粒径的反吹可能会导致填充流动。等待。

　　其中，可反吹的包括：粒径大于2um（2.7、3、3.5、4、5μm等）；不能反吹的有：粒径小于2um（1.8μmRRHD/RRHT；1.9μmPoroshell）。

　　使用中的常见问题

　　色谱柱使用中常见的问题包括pH值、温度、溶剂耐受性、压力、样品等。的使用条件不应超过制造商推荐的范围，包括压力、pH范围、水相耐受性、柱温等。当测试条件接近使用范围的极限值时，生活会受到影响。