毛细管电泳仪的操作指南
时间：2022-11-12 阅读：1823
毛细管电泳仪是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。广泛应用于生物、化学、医药行业，其分离范围覆盖了从离子、化合物等小分子，到蛋白、核酸、糖类等大分子甚至细胞和病毒等。尤其在离子、碱性药物、蛋白等极性化合物的分离中具有突出优势。
该设备采用紫外检测原理基于被测组分和背景电解质的吸光度不同，当被测组分通过检测窗时，吸光度发生的变化服从朗伯-比尔定律，即在一定的实验条件下，吸光度与被测组分的浓度成正比。
毛细管电泳仪的操作步骤：
1. 将设备放置于有空调的房间，保持室温恒定。同时，操作中控制毛细管及仪器恒温。
2. 缓冲液加压一段时间后，淌度和电渗流会变化，要经常更换。
3. 缓冲液要用0.45mm微孔滤膜过滤后使用。
4. 对未涂渍的毛细管柱每天使用前先用0.1mol/L氢氧化钠溶液、水及运行缓冲液各冲洗10min平衡后使用。更换缓冲液时，要用水冲洗3min后，再用缓冲液冲洗10min平衡后进样。
5. 样品宜溶于稀释5～10倍的运行缓冲液中，以获得好的峰形。
6. 为提高定量准确性，宜加入一内标。在保证峰形的前提下，样品宜用高浓度，进样时间应大于5psi×sec。
7. 摸索实验条件时，可先用一短柱，用磷酸盐、硼砂或Tris在不同的pH值条件下试验，当选定缓冲液种类时，可先改变pH值获得*佳分离，再改变浓度以获得较好的峰形及柱效。
8.实验结束后，用水冲洗5min，可将毛细管两端置于水中保存，也可用氮气吹干后保存。