SNL-191-Hi-five（昆虫细胞）_昆虫-武汉尚恩生物技术有限公司手机版

详细介绍

一、细胞基本属性
细胞名称	昆虫细胞
细胞别称	Hi-five
细胞货号	SNL-191
细胞种属	粉纹夜蛾
生长情况	半贴壁
培养条件	Grace’s Insect Medium+10%FBS+1%双抗
培养环境	air, 100%；28℃
二、细胞培养操作
换液周期	2-3天
培养基体积	T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
传代比例	1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法	1.轻轻吸走培养上清，留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞； 2.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清； 3.加新的培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 4.补足培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项	半贴壁细胞会附着瓶底，但贴壁不紧，轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱落，不需要胰M消化。建议使用培养皿培养，更适合吹打细胞操作，吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方	92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%*培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格	200-300万/ml，1ml每管
冻存方法	1.离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项	冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

Tips：
1.细胞半贴壁圆形或多角形生长，部分悬浮圆形，传代时均可收集培养，换液时将悬浮细胞离心收集后重新接回原瓶，若贴壁细胞较多活性较好时可以不要悬浮的细胞；
2.该细胞对胰M比较敏感，胰M消化后细胞形态会更多梭形，贴壁变紧，传代不建议使用胰M消化该细胞；
3.该细胞28度培养，建议27.5-28度之间，超过28度细胞状态会受损无法恢复，低于27度细胞生长速度会变慢，但恢复温度后可以恢复生长。

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