室内空气质量标准GB/T18883-2002室内空气中细菌总数检验方法，本方法适用于室内空气细菌总数测定。

一、微生物采样方法定义：

撞击法(impacting method)是采用撞击式空气微生物采样器采样，通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流,使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上,经37℃、48h培养后,计算出每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。

空气微生物采样器和辅助实验设备：

1、高压蒸汽灭菌器。

2、干热灭菌器。

3、恒温培养箱。

4、冰箱。

5、平皿(直径9cm)。

6、制备培养基用一般设备：量筒，三角烧瓶，PHA-4型pH计或精密pH试纸等。

7、FA-1型六级筛孔撞击式空气微生物采样器。采样器的基本要求:对空气中细菌捕获率达95％。操作简单,携带方便,性能稳定,便于消毒。

泰安环保六级撞击式空气微生物采样器介绍：

当今空气微生物污染所造成的严重伤害，已越来越受到重视，因而对各种空气污染采样监测的需求就更加迫切，空气微生物的数量及其大小分布乃是评价起危害的两个*的指标。本厂生产的FA-1型六级筛孔撞击式空气微生物采样器能够测定空气微生物的数量之外，它的特性是还能测出这些粒子的大小，而后者是判定空气微生物危害的重要指标之一。它是由六个撞击器组合成一体，每一级实际是一个单级采样器，利用6次反复撞击原理，绝大部分粒子特别是在气管及肺沉降的粒子基本都撞击下来，因而它采集到的粒子大小范围自然比单级的广，这是一些单级撞击采样器所的。撞击器的圆形喷口比裂隙式等喷口有更高的采样效率。采样时相对湿度逐级地升高（由第一级的39％增至第六级的88％），这十分有利于脆弱的B原微生物，特别是B毒粒子的存活，自问世以来常用不衰。

空气微生物采样器仪器特点：

1、仪器采用多功能微控制器控制模块，大屏幕LCD液晶显示，中文菜单，人机对话方式，需要人为干预时均有中文提示。

2、标准流量，仪器采用多功能控制模块控制直流电机的方式，

3、可任意设定采样流量 、单时段采样时间、多时段采样时间和采样流量、多时段采样间隔时间.

4、目前国内普遍采用玻璃流量计，调节流量，精度和误差都比较差，

5、这一款是我厂新开发，仪器自动控制采样流量，采用多功能微控制器控制恒流采样，自动补偿因为电压和阻力变化引起的流量变化。 (无玻璃流量计)，采样精度高，流量稳定。

6、用户可通过内置软件标定仪器参数。

空气撞击式微生物采样器 主要用途：

JWL-6A型六级筛孔撞击式空气微生物采样器可广泛用于疾B预防控制、环境保护、制药、发酵工业、食品工业、生物洁净等环境的空气微生物数量及其大小分布的采样监测，以及有关科研、教学部门作空气微生物的采样研究，为评价环境空气微生物污染的危害及其治理措施提供科学依据。

微生物采样器工作原理：

FA-1型微生物采样器模拟人体呼吸道的解剖结构及其空气动力学特征，采用惯用撞击原理，将悬浮在空气中的微生物粒子，按大小等级地分别收集在采样介质表面上，然后共培养及做进一步微生物分析，求出空气微生物粒子数量及其大小分布的特征。

撞击式微生物采样器  结构组成：

整套仪器由六级撞击器、主机（流量计）、定时器、三角架组成。

撞击器是由六级带有微笑喷孔的铝合金圆盘组成的，圆盘下方放盛有采样介质的平皿，用三个弹簧挂钩把六级圆盘紧密地连接在一起。每个圆盘上环形排列400个尺寸精确的喷孔。当含有微生物粒子的空气进入采样口后，气流速度逐级增高，不同大小的微生物粒子按空气动力学特性分别撞击在响应的采样介质表面上。第一、二级类似人体上呼吸道捕获的粒子，第三级-第六级类似下呼吸道捕获的粒子，这就在相当程度上模拟了这些粒子在呼吸道的穿透作用和沉着部位。

撞击法(impacting method)空气微生物采样器 技术参数：

1、采样流量为：28.3升/分 精确度：±2.5%.(非玻璃流量计)微电脑控制采样流量.

2、可任意设置：可自动任意设定：①采样流量 ②单时段采样时间③多时段采样时间和采样流量 ④多时段采样间隔时间.

3、工作电压：交直两用,内置充电电池
4、功率：≤30W；噪声：＜40dB .
5、撞击器外形尺寸：Φ108mm x 192mm    外型尺寸：约220×160×130mm(长×宽×高).
6、仪器重量：约5kg.

7、捕获率：≥98％

8、捕获粒子范围：

第一级  ＞7.0um          孔径1.18mm

第二级  4.7-7.0um        孔径0.91mm

第三级  3.3-4.7um        孔径0.71mm

第四级  2.1-3.3um        孔径0.53mm

第五级  1.1-2.1um        孔径0.34mm

第六级  0.65-1.1um       孔径0.25mm

多路智能微生物采样器中采样平皿的制备方法：

1.一般需氧的空气微生物采样用普通琼脂培养基（培养基1.8％-2.0％）若采集特殊微生物(如高营养的B原因，B毒，真菌等)可选用相应的采样介质。

2. 平皿采用国产Φ90 x 18mm玻璃培养皿，用高压蒸汽灭菌后备用。

3.在无菌条件下用量杯往 平皿内倒入琼脂24-30ml，琼脂表面与高密圈（8mm）一平，以保证采样时喷孔与琼脂表面之间2-3mm的撞击距离。

4.将加入采样介质的平皿，倒置放入37℃恒温培养箱中培养24小时，无杂菌生长方可使用

营养琼脂培养基成分:蛋白胨20g，牛肉浸膏3g，氯化钠5g，琼脂15～20g，蒸馏水1000ml。

制法将上述各成分混合,加热溶解,校正pH至7.4，过滤分装，121 ℃，20min高压灭菌。

微生物撞击器的清洗与消毒：

1、用中性洗涤剂温水清洗撞击器，用超声波洗则更好，可除去喷孔的塞物。

2、若喷孔发生阻塞，用高压气流或配备的细针清除

3、六级撞击器使用70％酒精擦拭消毒。

空气撞击式微生物采样器现场如何采样：

1.将三角架支开并锁紧，把三角架顶部调至水平，撞击器底部与三角架顶端螺纹连接，主机放在桌上或地上，用橡胶管连接 撞击器出气口→主机进气口。

2.顺序放入采样平皿，一手打开平皿盖，另一手迅速盖上撞击盘，然后按住撞击器上部，挂上三个弹簧挂钩。放入和取出采样平皿时，必须戴口罩，以防口鼻排出细菌污染平皿。

3．打开撞击器进气口上盖，离开采样点2米之外，即可启动采样。可用定时器设定采样时间，参照定时器使用说明书

4.采样时间长短视所才空气环境的污染程度而定，但不超过30分钟，一面长时间的气流冲击致使采样介质脱水而影响微生物生长。

5.为了保持菌落计数的准确性，每个平皿的均落在250个以下为宜，一般室外空气环境采10分钟，室内空气环境采1-5分钟即可。

6.采样完毕后，取出采样平皿扣上盖子，注意顺序和编号号码，切勿弄错。

六级微生物采样器采样选点要求：

1、采样点的数量：采样点的数量根据监测室内面积大小和现场情况而确定，以期能正确反映室内空气污染物的水平。原则上小于50㎡的房间应设1—3个点；50—100㎡设3～5个点；100㎡以上至少设5个点。在对角线上或梅花式均匀分布。

2、采样点应避开通风口，离墙壁距离应大于0.5rn。

3、采样点的高度：原则上与人的呼吸带高度相一致。相对高度0.5m—1.5m之间

微生物采样的时间和频率：

年平均浓度至少采样 3个月，日平均浓度至少采样 18 h，8 h平均浓度至少采6h、1h平均浓度至少采样 45 min，采样时间应函盖通风最差的时间段。

空气微生物的采样方法和采样仪器：

根据污染物在室内空气中存在状态，选用合适的采样方法和仪器 用于室内的采样器的噪声应小于 50 dB（A）。具体采样方法应按各个污染物检验方法中规定的方法和操作步骤进行

1、筛选法采样：采样前关闭门窗12h，采样时关闭门窗，至少采样45min。

2、累积法采样：当采用筛选法采样达不到本标准要求时，必须采用累积法（按年平均、日平均、8h平均值）的要求采样。

微生物采样怎么培养计数菌落：

1.将采样后的平皿倒置于37℃恒温箱中培养48小时，对有特殊要求的微生物则放相应条件下培养。

2.计数各级平皿上的菌落数，一个菌落既是一个菌落形成单位（cuf）

空气中微生物数量结果计算：

1.空气中微生物数量：是以每立方米空气中所含粒子数量表示之。

空气中微生物数量（cuf）/m3=所有平皿菌落数X1000

采样时间（min） x 28.3（L/min）

2.空气中微生物大小分布：是以各级的菌落数占六级总菌落数百分比表示之

各级微生物粒子数％= 该级菌落数 /六级总菌落数x100%