直播答疑 | 细胞培养实验室的环境要求和监测方法
时间:2024-08-29 阅读:847
普诺赛直播课
在8月20日普诺赛直播间中,左明祥老师为大家带来了《细胞培养实验室的环境要求和监测方法》的专题课程。
直播回放路径
①可在“武汉普诺赛”微信视频号查看;
②B站搜索“普诺赛生物”,点击最新视频观看学习。
每一份好奇心都是推动科学进步的力量,针对大家在直播中提出的问题,我们特意邀请左老师为大家进行深入解答。
另外,我们诚挚地欢迎大家在评论区畅所欲言。无论是实验技术问题还是感兴趣的课程主题,我们都将倾听您的每一个意见并积极回应,也会根据大家的需求定制专题讲座。感谢您的参与和关注!
直播问题解答
问
过滤器和水盘如何清洁?
在正常情况(未出现污染)下,培养箱的水盘应使用75%酒精擦拭消毒,然后加入无菌水并添加适量的抑菌剂。当培养箱出现污染时,可以使用新洁尔灭消毒液或3%的过氧化氢消毒液对水盘进行消毒,消毒时间为30 min。此外,也可以使用紫外灯进行消毒处理,消毒完成后用无菌水擦拭干净,添加无菌水和抑菌剂后正常使用。
培养箱内的HEPA过滤器一般不需要单独清洁,当使用出现异常时可以进行更换(需要专业维修人员更换)。对于超净工作台和生物安全柜中的过滤器,只需根据实际使用情况,定期(半年至一年)更换初效滤网即可。
问
消毒时间多久合适?
使用消毒液消毒,时间30 min左右即可;若使用的消毒液存在腐蚀性,应在消毒完成后使用无菌水将消毒液擦拭干净。使用臭氧或紫外灯的消毒时间一般也是30 min。
问
怎样检测二氧化碳泄漏?
如果需要检测泄漏至空气中的CO2浓度,防止其浓度过高可能引发的窒息风险,可以使用专门的CO2浓度检测仪,或者使用氧气浓度监测仪(适用于多种气体环境,如含CO2或氮气的)。
如果是要检测管道泄漏的位置,初步的检查方法可以是使用肥皂水在管道的接头位置进行涂抹,观察是否出现气泡;如需要准确检测,则需专业人员使用专业检测工具进行检测。
问
细胞培养间的实验服怎么消毒和存放比较合适?
实验服在清洗完成之后,可以放在专用的灭菌袋中,再放进高压蒸汽灭菌锅进行灭菌处理。灭菌完成后,将实验服连同灭菌袋一起放入烘箱中烘干备用。
问
臭氧消毒适用于什么实验室?
臭氧消毒适用于配套有新风系统的实验室。臭氧一般需要通过新风系统进入实验室空间,并在空间内达到一定浓度才能起到较好的消毒效果。消毒完成之后,也需要通过新风系统将残留的臭氧排出实验室,否则会对实验室环境产生影响。
问
支原体检测没有污染,但细胞状态不好,考虑什么污染呢?
细胞状态不好的因素有很多,首要且关键的一步是排除污染因素。如果通过各种检测手段(细菌、真菌通过琼脂板或空培检测,支原体使用试剂盒检测)都无法检测到污染,则可能不是因污染导致的。
如果仍怀疑存在污染,可以尝试向培养物中添加适当浓度的广谱抗生素。如果添加抗生素后细胞状态明显好转,说明确实存在某种难以检测的微生物影响细胞状态;如果添加抗生素后细胞状态未出现好转甚至更差,则需从其他方面排查细胞状态不好的原因,如培养基成分、培养条件、细胞特性或外部操作因素等。
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