数显恒温平滑肌槽,实验目的注意使用

一、实验目的

1. 学习离体平滑肌器官的实验方法。

2. 观察乙酰胆碱、阿托品、组织胺、扑尔敏和氯化钡等药物对离体回肠平滑肌的作用，并分析其作用原理。

二、实验原理

1. 乙酰胆碱：为胆碱能神经末稍释放的递质，对M、N受体均有激动作用，因此它的作用非常广泛，其中对胃肠道平滑肌的作用主要表现为激动M受体后，其收缩的幅度、张力增加，蠕动加快，曲线呈现上升。

2. 阿托品：为非选择性的M受体阻断药，它对M1、M2、M3受体均有阻断作用，从而对抗乙酰胆碱的作用，对胃肠平滑肌的作用则表现为松弛，降低蠕动的幅度和频率，曲线呈现下降。

3. 组织胺：广泛存在于体内的自体活性物质之一，组织中的组胺主要存在于肥大细胞及嗜碱性粒细胞中，当组织受到物理的或化学的刺激时可使肥大细胞脱颗粒，导致组胺的释放，释放的组胺可与靶细胞上的组胺受体结合产生生物效应。组胺受体有H1、H2、H3三种亚型，今天我们所使用的豚鼠回肠平滑肌上分布的受体主要是H1受体，当组胺与H1受体结合后，产生激动作用，引起肠管平滑肌的收缩，曲线呈现上升。

4. 扑尔敏：为常用的H1受体阻断药，可竞争性阻断H1受体，对抗组胺引起的肠管平滑肌收缩作用，曲线呈现下降。

5. 氯化钡：Ba2+与Ca2+化学结构相似，可模拟Ca2+的作用引起肠管平滑肌的收缩，曲线呈现上升。他不作用于受体，而是直接作用于肠管，此时再加阿托品或扑尔敏，不能拮抗，曲线无变化。

三、实验材料

1. 动物：豚鼠

2. 器材：恒温平滑肌槽（数显恒温平滑肌槽,数显平滑肌槽）1台、通气泵、铁支架、止水夹各1个，生物信号采集处理系统，张力换能器，1ml注射器4个，培养皿1个，50ml烧杯1个，普通剪刀、组织剪、眼科剪各1把，丝线若干。

3. 药品：台氏液、0.1%氯化乙酰胆碱溶液、0.1%硫酸阿托品溶液、0.1%磷酸组织胺溶液、0.1%扑尔敏溶液、8.33%氯化钡溶液

四、实验方法

1. 标本制备：取豚鼠一只，置于手中倒悬，以木槌击头至死，立即打开腹腔，找到回盲部，在离其2—3cm的回肠处剪断，取出回肠，置于盛有台氏液的培养皿中，沿肠壁分离并剪去肠系膜，将肠管剪成数段，轻轻冲出肠内容物，最后将肠管剪成2～3 cm的小段备用。

2. 冲洗恒温浴槽（数显恒温平滑肌槽，数显平滑肌槽），并在其中加入台氏液30ml （标线处），加热，维持水温在37℃～38℃。

3. 取上述备用回肠一段，两端用挂钩挂住，一端挂在通气钩上，放入浴槽，另一端连于张力换能器。通气钩另一端与通气泵相连，缓慢通入气泡，并调节1-2个气泡/秒。

4. 打开计算机，进入MSP-600生物信号采集系统，选择“通道1 → 张力”，并调整连线的松紧度。

5. 观察项目：待肠管在浴槽内稳定10 min左右，记录一段正常活动曲线，然后用注射器依次向浴槽中滴加药液。每加一组药时立即标记，并观察、记录收缩幅度。

（1）0.1%氯化乙酰胆碱溶液0.2ml

（2）0.1%硫酸阿托品溶液0.2ml

（3）重复给（1）

（4）0.1%磷酸组织胺溶液0.2ml，作用明显时给（5）

（5）0.1%盐酸苯海拉明溶液0.2ml

（6）重复给（4）

（7）8.33%氯化钡溶液0.2ml

（8）重复给（1）

（9）重复给（4）

6. 断电断气，取出回肠，冲洗浴槽（数显平滑肌槽）。

五、注意事项

1. 冲洗和分离肠管时动作应轻柔，尽量避免牵拉肠管；标本制备好后，放在盛有台氏液的培养皿中保存，以免影响标本的反应性。肠管两端穿线时，切勿将肠管缝死，只需穿过一层肠壁。

2. 实验前后应将浴槽*清洗，以免残留药物影响实验结果。

3. 台氏液必须新鲜配置，温度保持在37℃～38℃。

4. 通气时使气泡呈小米粒大小均匀上升，水泡不宜过大。

5. 调节连线松紧度，并且线应垂直桌面。

6. 加药时不要把药液直接加到回肠上，以免影响结果。

7. 浴温和肠肌的张力均可影响实验结果，应注意调节。