细胞培养系列第四期，继续为大家分享细胞培养中遇到的问题集锦。

16、

问：买的无血清冻存液说明书上写的直接放入-80度

答：那是直接冻存的，大多数冻存液都是梯度冻存

17、

问：初学细胞培养，养的是hepG2，每次到3天的时候培养基就会发黄，镜下看到像是死细胞聚集成团的大片东西，请问这种情况是染菌了吗？请问如何处理?那种像死细胞聚集成团的感觉是绿色，请问这是染菌吗？（不是每次这样，之前都很好，现在三瓶里有一瓶出现这种情况）

答：绿色的感觉像真菌，也有可能是细胞密度高了，细胞代谢物多。

18、

问：有用清除剂处理过一礼拜，看着挺干净，但是一礼拜培养三代又出来了，这种是没清除干净还是，可能环境有污染重复的染到了？

答：这个污染比较顽固，至少要杀2周，甚至一个月

19、

问：真菌污染一般原因是什么啊

答：真菌里的根霉一般是环境

20、

问：贝克曼细胞计数仪中DT值是啥意思？转染后DT值会增加吗？为什么会增加呢？

答：是群体倍增时间，就是细胞数增长一倍需要的时间，一个常用的评价细胞生长的指标。我们接触的一般是增加的。大量表达外源蛋白，会占用细胞生长的资源，这个可能是主要因素。外源基因插入基因组可能也有影响。

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