zeta life转染造血干细胞(HPCs)共转染2种质粒DNA（IF11.556）论文分享

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一、 转染造血干细胞(HPCs)或造血祖细胞-共转染两种质粒DNA文章概述：

检测特异性蛋白Sp1对FcγRIIB的影响在造血干细胞（HPCs ）中表达，FcγRIIB 启动子区域为(-1500 ~ +1从转录起始位点)，合成并亚克隆到pGL3载体, Sp1结合位点 5'-GGGGCGGGGC突变为 5'-AAGGCAAGGC，含有 Sp1过表达或含有模拟物。

使用美国Zeta Life公司Advanced DNA RNA转染试剂（#AD600025，Zeta Life, USA）对造血干细胞（HPCs ）共转染 1 μg 报告载体和 20 ng pSV-Renilla 表达载体（含、模拟物和 Sp1），转染的细胞是孵育 48 小时后收细胞并检测。

文章作者：重庆大学附属肿瘤医院肿瘤内科IF11.556

标题：FcγRIIB potentiates differentiation of myeloid-derived suppressor cells to mediate tumor immunoescape

二、转染造血干细胞(HPCs)

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FcγRIIB promoter luciferase reporter assay

To measure the effect of Sp1 on FcγRIIBexpression in HPCs, the FcγRIIB promoter region

(-1500 ~ +1 from the transcription starting site) wassynthesized by GenScript co., LTD (Nanjing, China)and subcloned into pGL3-basic vector (Promega,Madison, WI, USA), Sp1 binding site 5’-GGGGCGGGGC was mutated to 5’-AAGGCAAGGC.Lentivectors containing Sp1 overexpression or a lentivector containing mock were obtained from Genechem (Shanghai, China). The HPCs were transfected with 1 μg of reporter vector and 20 ng of pSV-Renilla expression vector (mock and Sp1) using Advanced DNA RNA Transfection Reagent (Cat No.AD600025, Zeta-life). Transfected cells were incubated for 48 h, Luciferase and Renilla activitie were measured using the dual-luciferase reporter system kit (Cat No. E1910, Promega). The transfection was performed according to the manufacturer' protocol.

三、美国Zeta Life 公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子转染试剂，此技术成为新的蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。

四、文献中所用转染试剂产品信息

产品名称：Advanced  DNA RNA  转染试剂

货号：AD600025、AD600050、AD600075、AD600150

规格：0.25ML、0.5ML、0.75ML、1.5ML

安培生物科技有限公司是美国 Zeta Life 公司的中国代理商。Advanced DNA RNA转染试剂，均经过反复充分验证，转染效果好且重复性佳，提供完整售后服务和技术支持。

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安培生物科技有限公司介绍：

安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户，提供*细胞体内可代谢的核酸转染试剂；inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产，包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等，为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务；提供以植物生物为平台基因序列全人源化、*的细胞培养可分解3D基质胶产品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务，努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业。