细胞侵袭实验详解剖析
时间：2022-04-13 阅读：1669
细胞侵袭也是与转移密不可分的。那么今天要分享的是最为常用的细胞侵袭方法：Transwell侵袭实验。与细胞划痕实验相比，Transwell相对过程复杂一些，下面就一起看看肿瘤细胞Transwell侵袭实验吧！
首先，为了对肿瘤侵袭和转移有更加清晰的理解，我们先来了解一下，肿瘤细胞转移的过程，主要包括以下5个过程：原位侵袭（Local invasion），肿瘤细胞内渗（Intravasation），循环系统存活（Survival in thecirculation），肿瘤细胞外渗（Extravasation），形成转移灶（Micrometastasis formation）等。其中细胞侵袭便发生在第一步，即肿瘤细胞在原位突破基底膜，然后内渗进入血管、淋巴管的过程，后期才开始进行转移。Trans可译为转移，穿过，而well则为小室的意思。外形如同一个小杯子（如下图），杯底有通透性的膜（孔径0.1－12.0µm，细胞侵袭一般用8.0、12.0μm）。Transwell原理简单来说，就是将Transwell小室放入培养板中，并将高营养液与低营养液用一层膜隔开，并在膜上室铺基质胶，用来模拟体内细胞外基质。肿瘤细胞放在低营养液中，为了获得更多的营养吃的更饱，这些细胞需先分泌基质金属蛋白酶（MMPs）将基质胶降解，才能穿过这层膜，进入高营养液，最后通过计数下室的细胞量即可反映肿瘤细胞的侵袭能力。细胞Transwell实验，可作为一种非常简便的研究肿瘤细胞迁移、侵袭以及转移情况的方法。这里所谓的“贴壁”是指细胞穿过膜后，可以附着在膜的下室侧而不会掉到下室里面去。可以通过给细胞染色（如结晶紫染色、台盼蓝染色、Giemsa染色、苏木精染色、伊红染色），在镜下计数细胞。由于某些细胞自身的原因或某些膜的关系，有时细胞在穿过膜后不能附着在膜上，而是掉进下室。这种情况下可以收集下层培养液，用流式细胞仪计数细胞量，也可用细胞计数的方法直接在镜下计数。间接计数法主要用于穿过细胞过多，而无法通过计数获得准确的细胞数所采用的方法，通过标记、染色处理（例如MTT法、荧光试剂检测、结晶紫检测）后，测量OD值或荧光值，间接反映细胞数量。文章中出现的Transwell侵袭实验图一般是这样的：（小tips：NC 即Negative control，表示阴性对照，siRNA上期刚说过，大家还记得吗？文章中大家可能还会遇到MOCK组，其实就是空白对照。所谓的空白对照有两种：一种是什么也不处理，类似阴性对照组；一种是只加转染试剂，不加转染的质粒或者siRNA，类似假手术组）这张图表示的是NC组（对照组）细胞侵袭少于siRNA组（沉默某基因的表达），可以理解为沉默某基因后，可以促进HGC-27细胞的侵袭。当然，这张图是比较简单的，复杂一点的无非就是条件多了，数据多了，大家只要理清楚细胞侵袭实验的原理，知道图是怎么做出来的，对应着图注都可以很轻松的理解图所表达的意思。
以上就是本期的内容，更多资讯，欢迎点击安培生物网站链接了解更多技术与产品资讯。
安培生物科技有限公司介绍：
安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户，提供*细胞体内可代谢的核酸转染试剂；inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产，包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等，为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务；提供以植物生物为平台基因序列全人源化、*的细胞培养可分解3D基质胶产品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务，努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业。
