步骤

1. 混合 10 ml 全血和 10 ml RPMI 生长培养基。
   
   生长培养基（RPMI1640 800 ml，FBS 200 ml，2 mmol/L-谷氨酰胺，5 μg/ml 两性霉素，50 μg/ml 庆大霉素）
   
   2. 取 15 ml 无菌离心管，加 3 ml Histo-paque1077（Sigma），在其上加 4 ml 稀释血，分离淋巴细胞。
   
   3. 室温 300 g 离心 30 分钟，弃上层清亮血浆。
   
   4. 收集不透明淋巴细胞层，细胞悬液倒入 50 ml 无菌离心管。
   
   5. 20 ml RPMI 1640 生长培养基洗两次，室温 300 g 离心 10 分钟。
   
   6. 10 ml 血分离的细胞悬于 1.0 ml 含 EB 病毒的上清。
   
   7. 细胞悬液（1.0 ml）放入 25 cm2 组织培养瓶，垂直放置，37℃ 5% CO2 孵育 1~3 小时。
   
   8. 孵育后，加入 3 ml 含 0.2 μg/ml 刀豆凝集素A 的 RPMI 1640 生长培养基，水平放置，使细胞均匀分布于全生长面。
   
   9. 每周加 1 ml 含刀豆凝集素A 的新鲜 RPMI 1640 生长培养基，不要吸出原培养基。

以上就是本期的内容，更多资讯，欢迎点击安培生物网站链接了解更多技术与产品资讯。

安培生物科技有限公司介绍：

安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户，提供*细胞体内可代谢的核酸转染试剂；inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产，包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等，为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务；提供以植物生物为平台基因序列全人源化、*的细胞培养可分解3D基质胶产品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务，努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业