黄曲霉毒素检测应用方案
时间：2022-04-20 阅读：1224
黄曲霉毒素检测应用方案
1、 执行标准
GB 5009.22-2016《食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》中第三法。
2、 仪器
液相色谱仪：日立Chromaster四元低压梯度泵 自动进样器 柱温箱 荧光检测器
光化学衍生仪：LABORAT 光化学衍生仪LYR-1092
色谱柱：LB-L25WPA-C18（4.6mm*250mm*5μm）
3、 色谱条件
激发波长：360nm，检测波长：440nm
流动相：（甲醇+乙腈）+水（50+50）+60，V/V
流速： 0.8mL/min
柱温：45℃
4、 样品来源
玉米粒，存放1个月，粉碎。
产地，河北省永年县。
5、 样品处置
按照GB 5009.22-2016中19.1——19.3执行
6、 标准品
黄曲霉毒素标准品：B1:1.032 µg/mL、B2:0.329 µg/mL、G1:1.078 µg/mL、G2:0.301 µg/mL
7、 线性数据
通过光化学衍生，黄曲霉得到良好的检测，线性关系见表1、图1、图2；色谱图见图3。
表1黄曲霉线性关系表
黄曲霉名称 | 浓度1（ng/ml） | 浓度2 （（ng/ml）） | 浓度3 （ng/ml） | 浓度4 （ng/ml） | 浓度5 （ng/ml） |
B1（G1） | 0.05 | 0.1 | 0.2 | 0.5 | 1.0 |
峰面积ms（B1+ G1） | 15015 | 30383 | 61183 | 170378 | 382826 |
B2（G2） | 0.015 | 0.03 | 0.06 | 0.15 | 0.3 |
峰面积ms（B2+ G2） | 10388 | 19107 | 40101 | 87928 | 188098 |
图1 （B1+G1）线性关系图
图2 （B2+G2）线性关系图
图3 黄曲霉线性关系色谱图
8、 精密度数据
将1.0ng/ml的溶液连续进样5次，得到色谱数据，B1+B2+G1+G2峰面积和的RSD为0.16%，数据见表2，色谱图见图4
表2 精密度数据表
进样次数 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
黄曲霉峰面积和 | 570924 | 569923 | 571763 | 570838 | 572278 |
图3 黄曲霉精密度色谱图
9、样品数据
按照标准处理样品，得到如下色谱图，玉米中黄曲霉为0.2μg/kg。色谱图见4
图4玉米中黄曲霉
10、结论
通过以上检测，柱后光化学衍生设备的荧光检测，测定黄曲霉毒素 B1，B2，G1，G2 的方法。方法线性及重现性良好，*可以满足现行标准的要求，根据对实际样品玉米中的黄曲霉测试，此方法可以很好的 将被测成分与基质干扰峰分离。