柱后衍生又称柱后反应，利用衍生反应使被测物与相应的试剂分析反应，以改变其物理或化学性质，使其被检测到。

 

选择柱后衍生系统需要考虑的因素有哪些？

 

1、试剂稳定性。足以用于日常工作的最小试剂稳定性是一天。这意味着给定样品的产率和信噪比必须至少保持8小时不变。

 

2、反应速度。当试剂与色谱柱流出物混合时，分析分离完成。因此，最重要的是分析物尽快反应。反应时间越长，则反应器所需的体积越大。体积较大时，峰形将变形。为了使谱带扩散最小，重要的是要使色谱柱和检测器之间的总时间（以及因此的体积）尽可能的短。如果反应缓慢（超过一分钟），可以使用高温减少反应时间。

 

3、可重复性。由于反应是“即时”发生的，因此当合并的色谱柱和试剂流流向检测器时，可重复性与泵的流速精度和温度有关。因此，对于任何给定的物种，即使是不完全的反应也将具有相同的保留时间。因此，重要的是泵保持恒定的流量，并且反应器保持恒定的温度。将色谱柱保持在恒定温度以确保正确分离和鉴定分析物也非常重要。

 

4、最小的试剂检测器响应。试剂（或其副产物）的颜色或背景荧光表示连续的噪声源。由于试剂相对于分析物而言存在过多，因此试剂的强背景信号可能会消除分析物的信号。基线噪声与背景信号成正比。

 

5、溶解度。所有物质都必须保留在溶液中，包括洗脱液和试剂的组合成分以及新形成的衍生物。沉淀物会堵塞毛细管，爆裂反应器和污垢检测器流通池。

 

6、流量均匀。基线噪声是洗脱液和试剂泵中流噪的函数。流量不均匀会导致混合不均匀，从而导致对背景信号的调制，该信号表现为噪声。折射率噪声甚至比吸收噪声更令人讨厌。

 

使泵流量均匀的常用技术是添加脉冲阻尼器或使用注射泵。大多数现代检测器对折射率噪声都不敏感。