金霉素检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验。往预先包被金霉素抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色，颜色的深浅和样品中的金霉素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
 

　　金霉素检测试剂盒(定性)操作流程:

　　1、试剂盒从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4°C。

　　2、设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50uL。

　　3、样本孔中加入待测样本50uL;空白孔不加。

　　4、除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100uL，用封板膜封住反应孔，37°C水浴锅或恒温箱温育60min。

　　5、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液(350μL)，静置1min,甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次。

　　6、每孔加入底物A.B各50uL,37°C避光孵育15min。

　　7、每孔加入终止液50uL,15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

　　金霉素检测试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶*溶解后再使用。实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，结果乘以5才是样本实际浓度。严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作，所有液体组分使用前充分摇匀。