Celetrix细胞电转方案说明
时间：2024-05-20 阅读：160
Celetrix电转几乎不挑细胞种类，都可以达到高效率。有一部分细胞种类，由于其本身具有的性质，在电转时需要特别注意采用合适的方案。
单核细胞和巨噬细胞相关的细胞系，有些电转质粒后细胞会在两三天内几乎全部死亡。THP-1，U937，HL-60和Molm13等细胞电转质粒后会死亡。其他老式的电转仪电转质粒到这些细胞后会有部分细胞存活，是因为其中有很多没有电转成功的细胞活下来了，对于电转没有什么意义。
Celetrix专门开发了试剂盒可以帮助单核细胞类的细胞系进行质粒电转，目前验证过THP-1和U937细胞转入质粒后部分细胞可以存活生长，从而使难做的细胞株稳转变得很简单。下图所示THP-1细胞电转Cas9-gRNA-Puro-GFP质粒时仅用1x10E6细胞就可以筛选得到稳转克隆并且成功进行基因编辑。
THP-1这些细胞电转mRNA, siRNA和 Cas9 RNP没有细胞死亡的问题。如果可以不使用质粒，电转非常容易，效率接近100%并且细胞存活非常好。
我们的THP-1试剂盒对于Molm13和SUP-M2细胞的质粒电转帮助不大，我们在继续研究其质粒电转方法。
小鼠的原代骨髓分离的单核细胞和造血干细胞非常特殊，不仅电转质粒后容易死亡，也会迅速降解mRNA和siRNA造成电转不成功的假象。只要电转液和mRNA和这些细胞接触1分钟，再转移到其他细胞上电转就会发现mRNA已经完全降解。小鼠脾脏细胞也有降解mRNA和siRNA的特性。而小鼠腹腔的巨噬细胞虽然电转质粒后容易死亡，电转mRNA却没有降解问题可以使实验顺利进行。
电转实验中碰到特殊现象时，用户可以发邮件向我们咨询，我们可以提供其他实验方案供选择。