关于细胞电融合仪有什么是我们不知道的?
时间:2024-07-15 阅读:276
细胞电融合仪是利用高电压电脉冲实现细胞融合的生物实验设备。细胞融合技术在生物医学研究和应用领域具有广泛的用途,如生产单克隆抗体、研究细胞分化、制备杂交瘤细胞等。
基本原理:细胞电融合仪通过施加短暂的高强度电脉冲,导致细胞膜出现可逆的微孔,从而诱导细胞融合。当细胞置于非常高的电场中,细胞膜变得具有通透性,允许外界分子扩散进细胞内,这一现象称为电穿孔或电融合。
操作方法:在实验中,将制备的游离细胞或原生质体置于电融合室中,然后在高频交流电场的作用下,细胞被极化成为偶极子,并造成细胞之间相互连接。控制高频交流电压的幅值和作用时间,使两细胞处于点接触状态,再施加方波脉冲刺激,由于电脉冲的瞬间作用,可击破两细胞接触点部位的质膜,促使细胞融合。
融合过程:细胞融合过程包括质膜的连接与融合、胞质合并,以及细胞核、细胞器和酶等互成混合体系。该过程可以通过施加合适的电脉冲来控制和实现。
融合分类:细胞融合可以分为同种细胞的融合和异种细胞的融合,后者也称为体细胞杂交。人工诱导细胞融合的方法包括生物法、化学法和物理法。
融合变化:在细胞融合过程中,出现的现象是细胞凝集,随后部分凝集细胞之间的膜发生粘连,并继续发展形成多核细胞,在培养过程中多核细胞进行核融合而成为单核的杂种细胞。
融合剂:细胞融合可以使用不同的促融合剂,包括病毒促进细胞融合(如仙台病毒)、化学融合剂(如聚乙二醇PEG等)和物理方法(如电融合)来人为地促使细胞融合。
需要注意的是,细胞电融合仪在进行细胞电融合实验时,应适当选择实验参数,如电场强度、脉冲时长和频率,这些因素将直接影响融合效率及细胞存活率。同时,实验操作需在无菌条件下进行,以避免污染风险。