TiYO™ 自体荧光淬灭系统解惑,助您更快上手操作
时间:2024-12-13 阅读:106
TiYOTM 采用光漂白LED技术,强力淬灭自体荧光,大幅提高信噪比,呈现清晰无比的荧光图像。特别适用于处理高度自发荧光的样本。在使用TiYOTM时,您是否对于如何操作它还有很多的疑问?无从下手?
当遇到操作问题,如何解决呢?
Q:TiYOTM是在染色前还是染色后使用?
A:在染色前使用TiYOTM
Q:是否只需在装满PBS的托盘中放置好组织切片就可以用TiYOTM进行淬灭?
A:对于自体荧光较弱的样品,只需将其插入TiYOTM就能获得淬灭效果。若要获得更充分的淬灭效果,我们建议先在室温下用3%过氧化氢/甲醇预处理10min,PBS冲洗5min,再进行淬灭操作。
Q:TiYOTM可以用于活细胞吗?
A:不可以。活细胞会受到TiYOTM的强LED照射,光刺激会导致细胞损伤,细胞即使未死亡也会受到影响。我们建议使用经过多聚甲醛(PFA)、福尔马林等固定后的样品。
Q:人脑样品进行2h淬灭后,会出现管状信号。有什么解决办法吗?
A:对于脑和肝组织,如果条件允许,推荐采用灌注固定的方法。此外,血细胞会发出很强的自体荧光,所以就排出血液而言,灌注固定是个很好的方法。如果仍有血细胞残留,建议在灌注固定液之前先用含肝素的PBS对组织进行一次回流冲洗。成功进行灌注固定的关键在于要保持固定液处于低温状态。
Q:可以使用表达绿色荧光蛋白(GFP)或红色荧光蛋白(mCherry)的样品吗?
A:不仅自体荧光,像GFP或mCherry这样的荧光也会被淬灭。如果您想使用表达GFP或mCherry的样品,在淬灭后可以通过抗体染色的方法来检测GFP或mCherry,不过这样做可能会比较耗时。
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