1、常规方法收集对数期的贴壁细胞或者悬浮细胞于试管中。

 

　　2、根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存的细胞数。

 

　　3、将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中，收集培养细胞沉淀，弃去离心管中的上清液。

 

　　4、加入适量的本冻存液于离心管中。轻柔地混匀细胞，制成细胞混合液。

 

　　5、将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中。

 

　　6、直接将分装好的细胞冻存管置于温冰箱中，可长期保存。

 

　　7、若需液氮长期保存，需先置其中至少一天后方可转至液氮罐中。

 

　　冻存液302-14681的冻存细胞复苏步骤：

　　1、从冰箱中取出冻存的细胞，立即置于水浴槽中快速解冻。

 

　　2、待冻存管中的细胞混合液*融化后，立即加入细胞培养基于冻存管中与细胞混合，将其中的混合液移至含有该细胞培养基的离心管中，收集冻存细胞沉淀，移去上清液（注意勿将细胞沉淀倒掉）。

 

　　3、加入适量的新鲜培养基，使用移液管缓缓加入细胞沉淀中，轻柔混匀，将混匀好的细胞移至事先准备好的培养容器中。

 

　　4、镜检观察，待细胞状态恢复后可进行其他研究或者培养处理。

 

　　冻存液302-14681的注意事项：

　　需在超净台内使用，以避免杂菌污染。

 

　　需和细菌混匀，否则细菌冻存液无法起到在低温冷冻条件下对细菌的保护作用。

 

　　对数期细菌冻存效果，但非对数期的或不是新鲜培养的细菌也可以用本细菌冻存液冷冻保存。