快速了解如何精准测试核酸热解链温度
时间:2022-03-31 阅读:1059
核酸研究
在核酸研究领域,天然的功能核酸(如各种miRNA、IncRNA以及shRNA等)和人工筛选的功能核酸(如脱氧核酶、核酶及适配体等)不断被发现或筛选出来。在基因功能研究、药物发现、生物传感器探针等领域的应用研究越来越多,尤其是核酸药物(如反义核酸、小干扰RNA等)的陆续上市,使得核酸成为当前生命科学和药物研究的热点之一。而核酸的高级结构是其行使这些功能的物质基础,因此高级结构的稳定性是核酸应用中需要考虑的至关重要的因素。对于核酸这类的较大的分子药物,紫外光谱是研究其结构变化的可行且简单的方法。
核酸结构的特性
1 核酸结构随温度的变化是可逆的,且不会使核酸变性。在一定的溶液条件下,一个核酸序列依赖氢键和静电作用在低温形成特定的高级结构,芳香性碱基发生堆积,产生减色效应,导致紫外吸收值降低。
2 当温度升高时,氢键和碱基堆积等弱相互作用被逐渐破坏,紫外吸收值逐渐升高。因此,配备温度控制的紫外光谱仪非常适合研究核酸结构的稳定性。
3 随温度的升高或者降低,当核酸的紫外吸收值达到高值的一半时,所对应的温度被定义为核酸的熔点,用Tm表示。Tm的大小反应核酸结构的稳定性的高低。当Tm值越大,核酸的高级结构越稳定。
基于以上特性,控温型紫外光谱仪在核酸结构研究中能发挥独一无二的作用。
Cary3500UV-Vis分光光度计可搭配多种不同配置的控温附件,并为核酸研究用户带来精准的测试结果。仪器采用了独家的空冷控温技术,升温速率可以从0.1℃/min到40℃/min,不仅能够分辨核酸高级结构变化中的多种形态,同时,一体化的附件设计理念也可避免传统水控温装置繁杂的管线和工作噪声。
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