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全新HRdm技术|引领匀场漂移管淌度质谱,进入高分辨时代!

时间:2022-05-19      阅读:1054

2021 年 11 月安捷伦在美国质谱年会 ASMS 发布新型离子淌度 LC/Q-TOF 6560C,并推荐了配合生物制药和生命科学研究的工作流程。Agilent 6560C 是目前市场上唯一可以无需校准物直接测量 CCS 值的高分辨淌度质谱。


1、Agilent 6560C 使用多路复用技术(Multiplexing技术)配合 HRdm2.0 软件进行数据处理,即可获得全时间段的高分辨离子淌度数据。


Agilent 6560C 采用创新的 HRdm 技术(High Resolution demultiplexing),可以实现漂移管淌度的分辨率>200,且无需通过延长离子路径、增加采集时间、缩小质量范围、优化目标化合物等手段来提高淌度分辨率。新 Agilent 6560C 仅需使用多路复用技术(Multiplexing 技术)配合 HRdm2.0 软件进行数据处理,即可获得全时间段的高分辨离子淌度数据[1]



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图1. Agilent 6560C 离子淌度质谱 HRdm 技术



2、配备碰撞诱导去折叠功能(CIU)-蛋白药物结构/稳定性研究的新方法


Agilent 6560C 配备了 CIU 功能,且采用低场无射频电压的漂移管设计,可以对蛋白/抗体药物的 Native 和 Denatured 形态进行研究。再结合 CIU Suite 2 软件(Uni. of Michigan – Brandon Ruotolo Group),可以轻松解析蛋白药物局部微小的结构差异、评估药物稳定性[2] [3]。同时 6560C 可以升级 e-MSion 的 ExD 碰撞池(裂解成 c、z 离子,提高序列覆盖率),从而提高对蛋白药物序列和翻译后修饰的表征能力。


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图2. Agilent 6560C CIU 功能-生物仿制药表征对比



3、均匀场漂移管淌度质谱(DTIMS)-碰撞截面积(CCS值)测量的金标准


Agilent 6560C 一如既往的为研究者提供了一种直接、准确、稳定测量化合物碰撞截面积 CCS 值的技术手段。


Agilent IM-MS 产品是目前市场上唯一无需校准物可直接准确测量 CCS 值的离子淌度质谱,测定准确度和理论值相比可小于 0.5% [4]。不同实验室之间测量的化合物 CCS 值相对标准偏差通常小于 0.29% [5],测量稳定性好,易于标准化。


当前 CCS 值越来越多应用于代谢组、脂质组、筛查等研究领域,极大提高了已知化合物和未知化合物鉴定准确度 [6] [7]



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图3. Agilent 离子淌度质谱准确度和稳定性展示





参考文献:


[1] Jody C. et al. Resolution of Isomeric Mixtures in Ion Mobility Using a Combined Demultiplexing and Peak Deconvolution Technique, Anal. Chem. 2020, 92, 9482−9492.

[2] Sarah M.  et al. Collision Induced Unfolding Classifies Ligands Bound to the Integral Membrane Translocator Protein, Anal. Chem. 2019, 91, 15469−15476.

[3] Xueyun Zheng. et al. Collision-Induced Unfolding Studies of Proteins and Protein Complexes using Drift Tube Ion Mobility-Mass Spectrometer, Anal. Chem. 2020, 92, 7218−7225.

[4] May, J. C. et al. Conformational Ordering of Biomolecules in the Gas Phase: Nitrogen Collision Cross Sections Measured on a Prototype High Resolution Drift Tube Ion Mobility-Mass Spectrometer. Anal. Chem. 86, 2107–2116 (2014).

[5] Stow, S. M. et al. An Interlaboratory Evaluation of Drift Tube Ion Mobility-Mass Spectrometry Collision Cross Section Measurements. Anal. Chem. 89, 9048–9055 (2017).

[6] Z. Zhou et al. Ion Mobility Collision Cross-Section Atlas for Known and Unknown Metabolite Annotation in Untargeted Metabolomics,Nature Communications, 2020, 11: 4334.

[7] T. Li, et al. Ion Mobility-based Sterolomics Reveals Spatially and Temporally Distinctive Sterol Lipids in the Mouse Brain, Nature Communications, 2021, 12: 4343.






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