应用干货 | 轻松解锁寡核苷酸纯化解决方案
时间:2022-05-24 阅读:771
研究表明,合成寡核苷酸和核酸是极具前景的治疗药物,也是用于研究和诊断二代测序(NGS)的重要组成部分。这些寡核苷酸的大小、序列复杂度和整体修饰存在差异。小寡核苷酸的大小范围从几个核苷酸到 40 或50 个碱基,并包含不同的 DNA 或 RNA 修饰。除了它们的一级结构外,这些分子可以为单链或双链结构,并包含分子或生物标签修饰。较大的分子(包括向导RNA 或 NGS 引物和探针)包含 50–200 个碱基,并根据其具体应用添加了不同的修饰和标签。RNA 治疗药物的序列可能包含数千个碱基,其通过体外生产合成,需要考虑*的纯化要求。
序列衍生的结构形成和杂质与全长产物相似,因此优化纯化和分析流程对于开发终的纯分子至关重要。
多样化的分子
然而,寡核苷酸的多样性要求填料具有多种粒径和孔径,能够应对纯化和分析挑战。PLRP-S 和 PL-SAX 等聚合物颗粒填料是分析和纯化寡核苷酸的理想选择。由于这些材料具有热稳定性和化学稳定性,因此可以实现多种技术的应用:
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在高温下运行可以加快传质,提高长链寡核苷酸的分离度
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高 pH 等变性条件可用于避免在分析和纯化过程中修饰、自我互补和富含 GC 的寡核苷酸聚集
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在高 pH 条件下进行阴离子交换可以抑制单个碱基的电离,从而能够分离寡核苷酸的磷酸二酯和硫代磷酸酯形式
轻松满足各种纯化需求:从 siRNA 到 mRNA
安捷伦了解寡核苷酸的多样性,无论分子大小或纯化规模如何,都能为您提供合适的填料和孔径。Agilent PLRP-S 和 PL-SAX 色谱柱都能为您提供出色的稳定性和重现性。此外,它们有多种孔径可供选择,能够满足您*的寡核苷酸纯化需求。
对于寡核苷酸等大分子而言,选择合适的孔径是需要考虑的一个重要因素。安捷伦提供一系列孔径,以平衡分离度和结合容量。
Agilent PLRP-S 色谱柱
小规模分析的理想选择,并可随着生产需求的增长而扩展
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反相填料 – 用于离子对反相模式
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五种孔径:100 Å、200 Å、300 Å、1000 Å 和 4000 Å
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填料粒径范围从 3 µm 到 50 µm
Agilent PL-SAX 色谱柱
无论是向导 RNA 还是核酸大分子,都能为您提供所需的纯度
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出众的聚合物阴离子交换填料
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两种孔径:1000 Å 和 4000 Å
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填料粒径范围从 5 µm 到 30 µm
结语
从分析级、半制备级和制备级规模到散装材料,在所需的规模拥有相同质量的固定相至关重要,Agilent PLRP-S 和 PL-SAX 色谱柱使您无论生产规模如何,都可以使用相同的优化填料。
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