磁珠提取实时荧光定量PCR和普通PCR有什么区别?
时间:2022-05-13 阅读:1371
磁珠提取实时荧光定量PCR是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团,通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,然后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
磁珠提取实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。
实时荧光定量PCR和普通PCR二者结果相同。都能说明生物体外的特殊DNA复制的整个过程的扩增效率和溶解温度情况。但主要区别有以下:
1、二者应用不同
荧光定量PCR主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作,反之不行。
2、二者系统组成不同
荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。
3、二者反应要求不同
荧光定量PCR对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp,普通PCR可以扩增长点的片段。
4、二者原理不同
荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光,普通OCR通过检测插入DNA中核算染料的量来测定PCR产物量。