CYTOOCHIPS™ YS-FN650 X18

CYTOOchip 是一个 19.5x19.5 mm 的盖玻片，其微图案通过光刻技术转移到高质量、低荧光硼硅酸盐玻璃上。 CYTOOchips 与所有倒置显微镜兼容。网格坐标印在芯片的底面，使用户能够随着时间的推移返回到wan全相同的单元/微图案。这些芯片与 CYTOOchambers 结合使用时是高分辨率活细胞成像的理想选择。

产品规格

参考：

10-010-13-18

图案：

是

尺寸：

小 (700 µm2)

涂层：

FN650

数量

18 件套

刊物

断开高尔基带与中心体的连接可防止定向细胞迁移和纤毛发生

乌尔塔多 L / 卡巴列罗 C / 加维兰 MP / 卡德纳斯 J / 博南斯 M / 里奥斯 RM

关键词：

中心体周围高尔基体带状组织、akap450 n 端片段、微管成核、中心体活性、高尔基体定位、定向细胞迁移、纤毛发生、y 形微图案盖玻片、细胞运动

上皮片位于细胞外基质 (ECM) 层上，即所谓的基底膜。在此类上皮细胞中，细胞在与 ECM 接触的细胞基底部分上建立基于整合素的粘附，并在远离与 ECM 接触的接触侧域的顶端部分上建立基于钙粘蛋白的细胞间粘附。两个粘附系统显示出不重叠的空间分布。细胞-细胞和细胞-ECM 粘附都是建立适当的上皮形态所必需的 ( 1 )。它们都参与将外部物理信号机械转导为细胞内信号传导（2）。参与细胞间粘附的粘附分子的生化性质、相互作用的能量以及沿细胞间连接产生的机械张力已被证明可以控制上皮细胞形状并确定各种系统中细胞间连接的方向 ( 3 – 6 )。然而，虽然细胞间粘附对上皮拓扑的贡献一直是许多研究的焦点，但对 ECM 的作用的关注却少之又少。 ECM 是一种动态支架，在形态发生过程中主动重塑，在刺激和引导细胞迁移以及定向干细胞命运方面发挥着重要作用 ( 7 , 8）。 ECM 还可以向上皮细胞传递形态调节信号，从而调节组织形态发生 ( 8 , 9 )。然而，ECM 在单细胞尺度上引导细胞定位的机制仍不清楚。 ECM几何结构已被证明可以调节细胞内结构 (10) 并为细胞极化提供空间信息 (1,11,12 )，但它如何调节细胞定位并从而在空间上组织多细胞结构仍有待研究。

结果

细胞间连接在缺乏 ECM 的区域稳定。

通过用纤连蛋白微图案控制 ECM 的位置，研究了 ECM 的空间分布对 MCF10A 细胞间连接定位的影响 ( 13 , 14 )（SI 方法）。为了给细胞间连接提供zui大程度的自由度并尽量减少参与其定位的参数数量，我们将分析重点放在有丝分裂后由子细胞形成的细胞双联体上。通过延时显微镜在完整的细胞周期中记录细胞核的空间坐标，并自动量化细胞的定位（图 S1、电影 S1和SI 方法））。我们测量了核-核轴的角度分布以及细胞运动的时间比例。正如之前工作 ( 15 )所预期的那样，细胞几乎是随机定位的，并且在方形微图案上彼此稳定地旋转（图 1 A和视频 S2）。在这种条件下，ECM 存在于细胞双联体的整个轮廓上，并为细胞运动提供连续的外围轨道。因为在上皮细胞中，钙粘蛋白倾向于从富含 ECM 的基极流向不含 ECM 的顶极（16），我们测试了 ECM 的缺失是否可以稳定细胞间连接并干扰细胞运动。 [H]形微图案被设计成提供两个没有ECM的大区域。与 [square] 上的行为形成鲜明对比的是，[H] 上的大部分细胞双联体根本不移动，从而形成高度稳定的构型，其中细胞位于间隙的每一侧（图 1 B和电影） S3）。我们通过对固定细胞上的E-钙粘蛋白进行染色进一步测试核轴是否垂直于细胞间连接。我们确认细胞间连接位于不存在 ECM 的间隙上方（图 1 D和E）。