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紫外可见分光光度计总述

时间:2023-03-21      阅读:467

  紫外可见分光光度计是一种高级实验仪器,主要用于分析物质的吸收光谱和浓度测定。它能够分析分子结构、测定无机物和有机物浓度、确定及两者间的反应动力学,是现代化学分析实验室中*仪器之一。
  一、原理
  紫外可见分光光度计利用分子吸收电磁辐射的原理来测定物质的浓度和分析物质的结构。其基本原理是,光通过样品后,样品会吸收部分特定波长的光,因为吸收峰的位置和强度取决于光通过的物质的化学性质和浓度。光子能量越高,波长越短,产生的波长就越靠近紫外线,光子能量越低,波长越长,产生的波长就越靠近可见光。
  基于上述原理,紫外可见分光光度计通过选择不同波长的光线来独立地测量样品的吸收值。紫外光区和可见光区的波长范围和对应吸收峰都是已知的,因此我们可以将所测得的吸收值与已知波长范围和吸收峰进行比较,从而获得样品物质的稳态或动态信息。
  二、结构
  紫外可见分光光度计主要由光源、光学系统、样品室、探测器、放大器和计算机等组成。
  光源: 光源是分光光度计最重要的部分,分光光度计光源通常分为卤素灯和氙灯两种。卤素灯大多适用于可见光区,氙灯则适用于紫外区。
  光学系统:为了使所得到的吸收光谱正确反映样品本身的性质,必须保证光线通过样品前和通过样品后的路径相等。因此,光学系统的结构和性能关系到分光光度计的测量精度和重复性。
  样品室:样品室通常是一个两端平面镜的长方体结构,用来容纳样品。样品室内还配有吸收盘和白色基底板,以便通过样品的吸收值进行比较。
  探测器:探测器的主要作用是将光线吸收后转化为电信号输出,分光光度计主要采用光电池或CCD阵列探测器。
  放大器:放大器用于将探测器输出的电流或电压信号放大,以使信号噪声比不被放大,从而提高信噪比和测量精度。
  计算机:现代分光光度计通常配备计算机,用于控制分光光度计,储存数据和进行分析和处理。
  三、使用方法
  使用紫外可见分光光度计测定物质浓度及其结构,主要包括样品制备、仪器开机、调整仪器参数、设置基准线、测量样品、数据处理等步骤。下面是具体流程:
  1.样品制备:将需要测量的物质制备成透明溶液或者粉末状。注意,样品必须足够纯净,如有杂质必须进行预处理。
  2.仪器开机:按照使用手册开启仪器,并且通过仪器的控制软件进行硬件预检测,满足仪器亮度均匀,电子自动停止。同时对仪器进行耗材调整和清洁。
  3.调整仪器参数:根据样品的性质,调整仪器上的波长选择器和滤光片,通常可以通过观察仪器屏幕上的波形图,找到样品的吸收峰的位置和强度。
  4.设置基准线:在测量样品前,先设置仪器的基准线。将空白试样放入样品室中,测量其吸收值,此时基准线为0。
  5.测量样品:将制备好的样品放入样品室中,进行测量。测量时应记录样品的吸收峰位置和强度,在同一波长范围内多次重复测量,确保数据的可靠性。
  6.数据处理:对测量得到的吸收光谱进行处理,通常包括峰高、峰面积等参数的计算和曲线拟合,得到物质的分子结构和浓度。
  四、总结
  紫外可见分光光度计是一种实验常用仪器,用于测定物质的结构和浓度。采用紫外光区和可见光区的波长范围和对应吸收峰来分析物质的吸收光谱。要正确使用紫外可见分光光度计,必须掌握其原理、结构和使用方法,并根据实际需要进行参数调整和数据处理,以确保测量数据的准确性和可靠性。
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