皖仪科技液相色谱对阿维菌素B1a的检测

前言

2015年，日本科学家大村智、爱尔兰科学家威廉·坎贝尔因研发抗寄生虫特效药物阿维菌素和伊维菌素做出的巨大贡献，获得了当年度的诺贝尔生理学或医学奖，这充分说明了阿维菌素在人类生产生活中的重要作用。

阿维菌素凭借其高效、光谱、高选择性的优点，不仅应用于防治果树、蔬菜、粮食等作物的叶螨、瘿螨、茶黄螨和各种抗性蚜虫，也广泛应用于杀灭鱼、虾等养殖水体和鱼体体表寄生的锚头鳋、中华鳋等寄生虫及松藻虫、水蜈蚣等水生昆虫。但阿维菌素易残留于水果和蔬菜等生物样本中，当人长期食用含有阿维菌素农药残留的食物后，当阿维菌素残留浓度达到一定量后，就会对人体的神经系统产生毒性作用，表现为四肢无力、肌肉震颤、抽搐和胃肠道反应，如恶心、呕吐、腹泻等。严重者还会出现对心脏的损害，如心律失常、心力衰竭等。所以，对阿维菌素残留量的检测很有必要。天然阿维菌素中含有8个组分，主要有4种即A1a、A2a、B1a和B2a，对应的4个比例较小的同系物是A1b、A2b、B1b和B2b。市售阿维菌素农药是以阿维菌素B1a为主要杀虫成分，以阿维菌素B1a的含量来标定。

本篇文章参考了《食品安全国家标准》GB23200.19-2016水果和蔬菜中阿维菌素残留量的测定 高效液相色谱法条件，采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置紫外检测器进行检测。

实验结果表明，阿维菌素的线性良好，R值在0.999以上，阿维菌素标准品色谱峰正常，理论塔板数在4500以上。阿维菌素标准品重复进样6次，定性RSD值为0.100%，定量RSD值为0.305%，重复性较好。最低检出限为3.4μg/L。说明了该方法配备皖仪科技LC3200系列仪器满足阿维菌素的检测需求。

1    实验方法

1.1  仪器配置

表1 高效液相色谱系统配置清单

1.2 测试条件

液相色谱条件

流动相：甲醇：水=89:11；

色谱柱：诺谱 Nova Atom SC18色谱柱,4.6×150mm；

柱温：40℃；

流速：1.0 mL/min；

进样量：20μL；

检测波长：245nm。

1.3 试剂及实验材料

甲醇：色谱纯；标准物质：阿维菌素标准品：(1000μg/mL in Methanol)；超声波清洗机。

1.4 溶液配制

1.4.1 阿维菌素标准工作液   

根据需要移取适量的阿维菌素标准品溶液（1000μg/mL），用甲醇稀释成适当浓度的标准工作液。标准工作液需每周配制一次。

1.4.2 标准系列工作溶液

用甲醇对阿维菌素标准品溶液（1000 μg/mL）进行稀释，配制质量浓度为0.025μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL标准系列溶液，使用前取20μl注入色谱仪。

2    结果与讨论

2.1 系统适用性

图1 单进甲醇溶剂色谱图

图2 阿维菌素标准品色谱图

表2 阿维菌素标准品色谱参数

说明：由上述谱图可见，阿维菌素标准品色谱峰正常，保留时间为5.360 min，理论塔板数为4500以上。

2.2 标准曲线

图3 阿维菌素标准曲线及相关系数

说明：本次测试的阿维菌素标准工作曲线浓度为0.025μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL。阿维霉素标准曲线线性范围较好，线性相关系数＞0.999，满足实验分析需求。

2.3 重复性

图4 阿维霉素标准品重复性实验色谱图

表3 阿维霉素标准品色谱参数

说明：阿维菌素标准品重复进样6次，保留时间RSD值为0.100%，峰面积RSD值为0.305%，重复性较好。

2.4 检出限

图5 阿维菌素标准品色谱图

表4 阿维菌素标准品色谱参数及检出限

说明：结果表明使用配备皖仪科技LC3200系列仪器检测阿维菌素标准品的检测限为3.4μg/L。

3 结论

本次采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置紫外检测器，依据《食品安全国家标准》GB23200.19-2016水果和蔬菜中阿维菌素残留量的测定 高效液相色谱法。实验结果显示，阿维菌素的线性良好，R值在0.999以上，阿维菌素标准品色谱峰正常，理论塔板数在4500以上。阿维菌素标准品重复进样6次，定性RSD值为0.100%，定量RSD值为0.305%，重复性较好。最低检出限为3.4μg/L。说明了该方法配备皖仪科技LC3200系列仪器满足阿维菌素的检测需求。