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原代细胞培养的主要注意事项

时间:2024-10-22      阅读:140

原代小梁网细胞培养体系是一个为体外生长的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳动物的小梁网细胞设计的理想的完培方案。本体系是一个基于碳酸氢盐的缓冲体系,可以在孵育的5%的CO2的气体环境下维持一个围绕pH7.2的酸碱缓冲体系。本体系是一个无菌的液体混合系统,其中包含必须和非必须氨基酸、维生素、激素、生长因子、微量元素和一些其他的有机和无机化合物以及胎牛血清(10%)。本培养体系是基于固定配方配制的液态培养体系,可以为体外培养的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳动物的小梁网细胞提供一个确定适宜的平衡营养环境,并且可以选择性的促进小梁网细胞的扩增。
注意事项:
1、组织块培养法:
(1)刚接种后,组织块粘附不牢固,观察和转移过程中动作要轻,以防引起液体振荡,使组织块漂起
(2)培养初期,要注意观察有无细菌、霉菌污染
(3)原代培养要及时观察,记录
(4)过3-5天,需要换液以除去漂浮组织块和残留的血细胞,保证原代细胞正常生长
2、消化培养法:某些特殊类型细胞如内皮细胞需用特殊的消化手段和步骤进行
3、器官培养和组织块培养类似
4、悬浮细胞培养法:注意调整细胞浓度
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