核酸定量检测试剂盒使用要求详解：

　　1.生产工艺

　　配制工作液：配制工作液的各种原材料及其配比应符合要求，原材料应混合均匀，配制过程应对pH、电导率等关键参数进行有效控制。

　　半成品检验：按批号抽取规定数量的半成品。以参考品／对照品进行半成品质量控制。如果产品具有国家标准品或参考品，应以其进行检验。如果产品不具有国家标准品或参考品，应根据规定制备相应的企业参考品进行半成品检验。

　　成品质量控制：每一批核酸类检测试剂报批批量至少为5000人份。产品完成包装后，应根据生产量进行抽样和生产记录审核。以参考品／对照品或参考品进行成品质量检验。结果应符合要求。

　　2.质量控制

　　半成品质量控制：按批号抽取规定数量的半成品。以参考品／对照品进行半成品质量控制。如果产品具有国家标准品或参考品，应以其进行检验。如果产品不具有国家标准品或参考品，应根据规定制备相应的企业参考品进行半成品检验。

　　成品质量控制：每一批核酸类检测试剂报批批量至少为5000人份。产品完成包装后，应根据生产量进行抽样和生产记录审核。以参考品／对照品或参考品进行成品质量检验。结果应符合要求。

　　稳定性试验：每批试剂批放行前，必须完成稳定性试验，并达到相应的质量标准。稳定性试验可在特定温度或特定条件下完成。

　　3.核酸定量检测试剂盒性能验证

　　方法符合率：选取阴性样本至少5例，阳性样本（宜包括弱阳性/低扩增的样本），一般不少于10例样本。其中罕见或少见病种的项目，可酌情减少样本例数。若弱阳性/低扩增样本不好获取，可用适当稀释阳性样本获得类似效果。

　　检出限：所有检验程序在厂家试剂使用说明书等有声明检出*时，检测项目在有标准物质时，或以定量形式表达定性结果时，应进行检出限的验证。

　　交叉反应：应验证与检测对象可能存在交叉反应的核酸物质对检测的影响。对于病原体核酸检测来说，主要指与检测对象核酸序列具有同源性、易引起相同或相似临床症状的病原体核酸。