南京建成丙氨酸氨基转移酶测试盒微板法(C009-2-1)现货供应
时间：2024-04-11 阅读：360
产品名称：南京建成丙氨酸氨基转移酶测试盒微板法(C009-2-1)现货供应
产品货号：C009-2-1
产品品牌：南京建成
产品规格：96T
操作过程：
1、样本前处理:
①、血清（浆）及其它液体样本待测：直接测定。
②、动物组织样本：准确称取组织重量，按重量（g）：体积 (mL)=1:9 的比例，加入 9 倍体积的生理盐水，冰水浴条件 下机械匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清液待测。
③、培养细胞样本前处理：将收集好的细胞用等渗缓冲液（推 荐 0.1mol/L pH7～7.4 磷酸盐缓冲液或生理盐水）清洗 1～ 2 次；1000 转/分,离心 10 分钟,弃上清,留细胞沉淀，加入匀 浆介质（推荐加入 0.1mol/L pH7～7.4 磷酸盐缓冲液或生 理盐水），冰水浴条件下超声破碎或手动匀浆，制备好的 匀浆液不离心，待测。
2、操作表：
测定孔 | 对照孔 | |
基质液（μL）37℃已预温 | 20 | 20 |
待测样本（μL） | 5 | |
37℃反应 30 分钟 (测定孔每吸取一个样本，将吸嘴伸入孔板底部基质液中， 反复吸打混匀,但注意不要吸入气泡) | ||
2，4—二硝基苯肼液（μL） | 20 | 20 |
待测样本（μL） | 5 | |
37℃反应 20 分钟 (对照孔每吸取一个样本，将吸嘴伸入孔板底部液体中，反 复吸打混匀, 但注意不要吸入气泡) | ||
0.4mol/L 氢氧化钠液（μL） | 200 | 200 |
轻轻水平摇动 96 孔板混匀，室温放置 15 分钟，波长 510nm，酶标仪测定各孔 OD 值，以绝对 OD 值(测定孔 OD 值减去对照孔 OD 值），查标准曲线，求得相应的 ALT/GPT 活力单位。 | ||
注意事项：
1、比色法中常用的有赖氏（Reitman-Frankel）法及金氏（King）法。赖氏法标准曲线所定单位数，是用实验方法和卡门氏分光 光度法（速率法）作对比测定求得的。以卡门氏单位报告结果，比较准确。 卡门氏单位定义：1mL 液体，反应液总容量3mL，波长340nm，1cm 光径，25℃，1min 内所生成的丙酮酸，使NADH氧化成 NAD+而引起吸光度每下降0.001 为一个单位（1卡门氏单位=0.482 U/L，25℃）。
2、一般血清标本内源性酮酸很少，血清对照孔吸光度值接近试剂空白孔（以双蒸水代替血清，其他和对照孔同样操作）。所以，成批标本测定时，一般不需要每一标本都作本身血清对照孔，以试剂空白孔代替即可，但对脂血、黄疸或溶血血清，每份标本应作对照孔。
3、酶活力超过 150 卡门氏单位时，用生理盐水稀释血清后重测。
4、应将一般血清的对照孔（或称标本空白孔）的吸光度作为日常质控的指标之一；如相差大，可考虑α-酮戊二酸浓度、DNPH浓度及仪器等原因引起。
5、血清中 ALT 在室温（25℃）可保存2 天，在0～4℃可保存一周，在-25℃可保存 1 个月。
欢迎订购：
货号 | 产品名称 | 规格 |
C009-2-1 | Alanine aminotransferase Assay Kit | 96T |
天津益元利康生物科技有限公司现货供应南京建成丙氨酸氨基转移酶测试盒微板法(C009-2-1)，欢迎选购！
