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IHC染色不均匀分析

时间:2024-11-22      阅读:20

上次我们分享了IHC未染色或无信号的原因分析,这次让我们来看看IHC染色不均匀是为什么吧。

一、组织切片制备

解释组织切片薄厚不均匀

建议更换刀片

二、组织固定

1.解释酒精固定不足会产生伪影

建议延长固定时间;尝试不同的固定液

2.解释固定延迟导致抗原扩散

建议立即固定组织可以考虑使用交联固定剂

image.png

三、脱蜡

解释脱蜡不wan

建议使用新鲜的二甲苯

四、抗体兼容性

解释一抗可能结合其他抗原上的表位

建议从多抗切换至单抗;尝试不同的单抗

五、透化

解释细胞膜被破坏,膜蛋白丢失

建议使用低浓度或更温和(Tween-20)的透化试剂

六、组织切片状态

解释组织切片未保持湿润

建议在染色阶段避免组织切片干燥

 

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