siRNA转染实验原理和步骤
时间:2024-11-29 阅读:37
一、转染试剂
中科百抗PolyTool™siRNA Transfection Reagent(siRNA专用转染试剂,货号:BM350104)是一款新型、高性能的siRNA专用转染试剂,具有较强的siRNA压缩能力,能够将RNA高效率、无损地递送到真核细胞中。与其它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒性低、效率高、稳定性好、转染操作简单、重复性好等优点。
二、产品特点
1.不受血清影响:转染前无需换液,转染效果不受培养基中血清影响;
2.毒性低:低细胞毒性,转染后对细胞活力影响极小;3.稳定性高:本产品可稳定保存2年;
4.操作简单:转染只需4步,使用方法简便;
5.低siRNA用量:使用更少的siRNA,依然有更高的沉默效率。
三、实验流程
1.细胞种板:参考附录推荐密度接种细胞,使转染时细胞密度达到60%~70%。
2.细胞转染:
(1)使用本转染试剂前涡旋5秒,然后取X μL转染试剂至添加好Y μL opti-MEM培养基的无菌EP管中,吹打混匀;
(2)向(1)所述溶液中添加Z μg质粒DNA(建议质粒siRNA浓度配制为100 ng/μL或10 μM),吹打混匀;
(3)将(2)所述溶液室温静置10~15 分钟;
(4)将(3)所述溶液加入(1)所述细胞培养板的一个孔中(可根据需要的孔量配制母液)。
3.检测转染效果:37℃培养24-48小时后检测基因沉默效率。
siRNA专用转染试剂中科百抗PolyTool™ siRNA Transfection Reagent代理——天津益元利康生物科技有限公司,成立于2018年,坐落于天津经济技术开发区。公司产品线涉及细胞与基因治疗、免疫学、分子生物学、细胞生物学等多个方向,专注于生命科学试剂、耗材、细胞、仪器等产品销售,经营的品牌主要有:ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam等等。我们提供质优价美的产品、及时到位的服务,努力成长为生命科学和生物技术企业的优质供应商。