如何降低人细胞ELISA试剂盒实验的误差概率?
时间:2022-09-20 阅读:633
如何降低人细胞ELISA试剂盒实验的误差概率?我们知道做实验时出错是正常的,但如果做到以下这些可以减少错误。
1、检验技术员
应具备实验室操作的基本素质和实践经验。熟练操作实验仪器和仪器,有一定的总结和分析问题的能力,能够及时妥善地解决实验中出现的意外情况。
2、使用经过校准的微量移液器来消除自然误差。移液器的准确性对于定量检测尤为重要。
3、仔细阅读说明
严格按照说明书进行规范操作。不同批号人细胞ELISA试剂盒的试剂不能混用。值得改进的地方,只有经过反复测试和确认,才能改进。
4、*清洗
如果板没有*清洗,酶结合物的背景颜色会显示假阳性。洗涤液应新鲜并立即制备。旧的洗涤液可能有较高的背景或假阳性。
5、严格控制反应时间
反应时间过长,酶失活;如果反应时间过短,酶联物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合,产物结构松散不稳定,容易洗掉,可能造成假阴性。
6、注意ELISA试剂盒的保质期。超过保质期的试剂不能使用。
7、评估试剂的实用性
试剂的稳定性对准确性极为重要。试剂使用前应反复进行阴、阳性对照及样品比对试验,确定试剂符合要求后方可使用。
8、严格控制显色时间
如果显色时间过短,与终止液反应终止后,底物偶联物的量过少,容易出现假阴性。
如果超过规定时间显色,则应判断为假阳性,这可能与试剂本身有关。加入显色剂后应立即显色,不得报告为阳性,可能是背景显色所致。
9、准确快速添加样品
如果加样不准确,酶产品的量就无法确定,人细胞ELISA试剂盒直接影响显色结果。显色深度和A值的测定与显色剂和终止液的加入量有关,加样时应谨慎。
对于要求在一定时间内加样的实验,加样慢会出现误差,而且试剂暴露时间过长,尤其是室温过高时,保存期会延长,被缩短甚至无效。