盘点 FITC-COOH与氨基化合物的共价连接
时间:2023-07-18 阅读:302
FITC-COOH(Fluorescein-Carboxylic Acid)可以通过与氨基化合物的共价连接来实现荧光标记。以下是一种常见的方法:
1. 准备FITC-COOH溶液:将FITC-COOH溶解在适当的溶剂中,如二甲基亚砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF)。根据实验需求,调整FITC-COOH的浓度。
2. 准备氨基化合物溶液:将待偶联的氨基化合物溶解在缓冲溶液中,以确保适当的pH条件和反应环境。调整氨基化合物的浓度。
3. 活化FITC-COOH:向FITC-COOH溶液中加入活化试剂,常用的活化试剂为N,N'-环己基碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)。这些活化试剂将激活FITC-COOH中的羧酸官能团,使其具有更高的反应活性。
4. 反应:将活化的FITC-COOH溶液与氨基化合物溶液混合,并在适当的反应条件下进行反应。通常情况下,反应在室温下进行一段时间,如1-2小时。反应时间可以根据具体实验设计和需要进行优化。
5. 反应停止:反应完成后,可添加一些反应停止剂,如氨基醇(如甲醇或乙醇),来中和剩余的活化试剂。
6. 纯化:为了去除未反应的FITC-COOH和其他杂质,需要对反应混合物进行纯化。常用的纯化方法包括凝胶过滤、柱层析或溶剂萃取等。选择合适的纯化方法,根据实验需求和目标分子的性质进行优化。
需要注意的是,在进行FITC-COOH与氨基化合物的共价连接反应时,应根据目标分子的性质和实验要求选择适当的反应条件和活化试剂。
CY7-Dextran MW:5K
Mal-PEG2K-cyclo(RGDfk)
cy5.5-PEG2000-SH
CY7.5-Dextran MW:10K
PCL2K-PEG2K-CY7
BSA-CY3(低偶联率)
BSA-CY3(高偶联率)
Cy5 NHS
CY5单体
sulfo cy7 NH2
Sulfo-Cy5 NHS ester
sulfo Cy3.5 COOH
Cy3 alkyne
胱氨酸(cystine)-FITC
Cyclodextrin-PEG600-NH2
Sulfo CY5 COOH
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