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盘点 FITC-COOH与氨基化合物的共价连接

时间:2023-07-18      阅读:302

FITC-COOH(Fluorescein-Carboxylic Acid)可以通过与氨基化合物的共价连接来实现荧光标记。以下是一种常见的方法:

 

1. 准备FITC-COOH溶液:FITC-COOH溶解在适当的溶剂中,如二甲基亚砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF)。根据实验需求,调整FITC-COOH的浓度。

 

2. 准备氨基化合物溶液:将待偶联的氨基化合物溶解在缓冲溶液中,以确保适当的pH条件和反应环境。调整氨基化合物的浓度。

 

3. 活化FITC-COOH:FITC-COOH溶液中加入活化试剂,常用的活化试剂为N,N'-环己基碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)。这些活化试剂将激活FITC-COOH中的羧酸官能团,使其具有更高的反应活性。

 

4. 反应:将活化的FITC-COOH溶液与氨基化合物溶液混合,并在适当的反应条件下进行反应。通常情况下,反应在室温下进行一段时间,如1-2小时。反应时间可以根据具体实验设计和需要进行优化。

 

5. 反应停止:反应完成后,可添加一些反应停止剂,如氨基醇(如甲醇或乙醇),来中和剩余的活化试剂。

 

6. 纯化:为了去除未反应的FITC-COOH和其他杂质,需要对反应混合物进行纯化。常用的纯化方法包括凝胶过滤、柱层析或溶剂萃取等。选择合适的纯化方法,根据实验需求和目标分子的性质进行优化。

 

需要注意的是,在进行FITC-COOH与氨基化合物的共价连接反应时,应根据目标分子的性质和实验要求选择适当的反应条件和活化试剂。

 

CY7-Dextran MW:5K

Mal-PEG2K-cyclo(RGDfk)

cy5.5-PEG2000-SH

CY7.5-Dextran MW:10K

PCL2K-PEG2K-CY7

BSA-CY3(低偶联率)

BSA-CY3(高偶联率)

Cy5 NHS

CY5单体

sulfo cy7 NH2

Sulfo-Cy5 NHS ester

sulfo Cy3.5 COOH

Cy3 alkyne

胱氨酸(cystine)-FITC

Cyclodextrin-PEG600-NH2

Sulfo CY5 COOH

 

本篇图文信息均由【星戈瑞stargraydye】小编提供,如需了解详细烦请联系!


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