大肠杆菌(Escherichia coli)，简称E.coli，是一种常见的革兰氏阴性菌，人和动物的肠道中都存在大量的大肠杆菌。在生命科学研究中，被广泛应用于基因表达、蛋白质表达和酶反应等方面。下面介绍一下它的使用方法。

 

　　1.制备大肠杆菌培养基

 

　　制备培养基是培养它不可少的步骤。选取适合其生长的培养基，在按比例混合后进行滤器灭菌。常用的培养基有Luria-Bertani（LB）培养基、M9培养基、超优培养基等。其中LB培养基最为常用，制备简单易行，成本较低。

 

　　2.取样并接种

 

　　在培养前，需要从凝胶管上提取培养物，并加入到含有培养基的瓶子中进行接种。接种时可以选择移液管或者注射器等工具，注意操作过程中要消毒清洗。

 

　　3.培养条件

 

　　其生长条件相对较为宽泛。通常在37度下培养，培养时间根据实验要求可长达数天。培养过程中要注意无菌操作、瓶盖勿开、颠倒培养等。

 

　　4.分离纯化

 

　　大肠杆菌是一种肠道菌群以下（通量） 的微生物，所以在培养过程中很容易出现杂菌。在进行特定实验时需要净化大肠杆菌。此时可以通过法拉第笼或者摸板法等方法进行筛选和分离。

 

　　5.储存

 

　　保藏温度通常是-80度冷冻库，若要长期保存，也可以使用甘油溶液预冷却后进行长期保存。

 

　　总之，大肠杆菌的使用方法包括制备培养基、取样接种、培养条件、分离纯化和储存。希望本篇文章可以对大家在实际操作中有所帮助。