土壤纤维素酶(S-CL)测试盒的主要测定步骤
时间:2023-05-11 阅读:715
试剂组成和配制:
试剂一:液体120mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。用前加11mL蒸馏水充分溶解(可50℃震荡溶解)。
试剂三:液体10mL×1瓶,4℃保存。粗酶液提取:新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50目筛。
按照土壤质量(g):
试剂一mL)为 1:5~10的比例(建议称取约0.1g土壤,加入1mL试剂一),振荡混匀。
测定步骤:
测定管:在震荡条件下取100μL土壤悬液到EP管中,加入100μL试剂二,30℃震荡避光培养3h,从中吸取134μL到黑色不透光96孔板中,加入66μL试剂三后用多功能酶标仪进行检测,激发光波长365nm,测定波长470nm。
对照管:取100μL蒸馏水到EP管中,加入100μL试剂二,30℃震荡避光培养3h,从中吸取134μL到黑色不透光96孔板中,加入66μL试剂三后用多功能酶标仪进行检测,激发光波长365nm,测定波长 470nm。ΔA=A测定-A对照。