标准型基质胶-含酚红

货号：MG2234、MG4234、MG6234

存储条件：-80℃ 保存，避免反复冻融。

产品简介：

基质胶是从Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤提取的可溶性细胞培养基质，含有丰富的细胞外基质蛋白，主要包括层粘连蛋白、胶原IV、肝素硫酸酯蛋白聚糖、巢蛋白以及大量的生长因子。

基底胶在室温条件下，聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，以及对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达的研究。基质胶也适用于类器官生长、分化、代谢和毒理学研究。高浓度的基质胶可以用于动物体内成瘤实验的细胞包被。

操作方法：

一、薄胶成胶方法：

1. 冻融后，用预冷的移液枪头混匀基质胶成匀浆状。

2. 将需要使用的培养板置于冰上，加入浓度为 50μL/cm。

2 生长面积的基质胶。

3. 在 37℃放置 30 分钟，即可使用。

二、厚胶成胶方法：

1. 冻融后，用预冷的移液枪头混匀基质胶成匀浆状。

2. 将需要使用的培养板置于冰浴，将培养的细胞与基质胶混合，用移液枪头使其悬浮于基质中。加入浓度为 150-200μL/cm2 生长面积的基质胶。

3. 在 37℃放置 30 分钟，可成胶。可以加入细胞培养的基质，也可使细胞直接生长在胶表面。

三、薄层包被方法：

1. 冻融后，用预冷的移液枪头混匀基质胶成匀浆状。

2. 根据使用需要，采用无血清培养基稀释基质胶。根据实验需要确定最佳包被浓度。

3. 将稀释的 基质胶包被于所需的培养器皿中，包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育 1 小时。

4. 去除未结合的基质胶，用无血清培养基轻轻地冲洗。

四、类器官培养方法：

1. 用适量的4℃过夜解冻的基质胶重悬细胞或组织沉淀，推荐重悬密度为每50μL基质胶悬液包含1X10^5细胞，重悬后可置于冰上，重悬时间不超过30s以避免基质胶过早凝固。基质胶稀释比例应在70%以上以保证培养过程中基质胶的结构稳定性。

2. 将基质胶和组织细胞的混合悬液点入预热的24孔板底部正中央，每孔30μL左右，避免悬液接触孔板侧壁。为防止基质胶室温凝固，此步骤应尽快完成。

3. 将接种完成后的培养板至于 37℃二氧化碳恒温培养箱中，孵育 15min 左右待基质胶凝固。

4. 待基质胶wanquan凝固后，沿壁缓慢加入类器官培养基，24孔板每孔 500uL，避免破坏已凝固结构。

5. 将24孔板置于37℃二氧化碳培养箱中培养。

6. 每 3 天更换一次培养基，更换培养基时应避免破坏基质胶。

五、胚胎干细胞 ES 和诱导多能干细胞 ips 培养（推荐使用hES验证款基质胶）

1. 在冰上解融一份分装的基质胶。

2. 在50 mL离心管中加入24 mL的预冷的DMEM/F-12，并且放在冰上。

3. 将解融的基质胶按一定稀释比例（如1:100）加入到预冷的 DMEM/F-12中（在50 mL离心管中），混匀。

4. 稀释好的基质胶溶液必须立即使用，进行培养皿的包被。推荐的包被体积参见下表。

5. 轻轻晃动培养皿，将基质胶溶液均匀的覆盖到培养皿的表面。

注意：如果培养皿的表面没有被基质胶溶液wanquan覆盖，则不能用于人ES和iPS细胞培养。

6. 培养皿使用前至少在室温(15 - 25°C)孵育1个小时，不可使基质胶蒸发。

注意：如果不是立即使用，包被好的培养皿必须密封防止基质胶溶液的蒸发，包被后可以在2 - 8°C放置一周。在使用之前，至少在室温（15 - 25°C）中放置30分钟恢复到室温。

7. 轻轻的将培养皿的一侧倾斜，使多余的基质胶溶液在一侧的边缘汇聚。通过移液器或者泵吸取多余的基质胶溶液。确保包被的表面没有被刮到。

8. 立即加入ES细胞培养基（例如，6孔板每孔2 mL）。

注意事项：

1. 收到产品并确认到货情况无异常后，请将 基质胶储存于--80℃冰箱，短暂使用可置于--20℃冰箱。切勿将基质胶储存于自动除霜的冰箱中。在第一次融化后请分装保存，应避免基质胶反复冻融。

2. 因基质胶在 10℃以上即可成胶，在操作过程中，保持基质胶一直置于冰上，所有接触的细胞培养器皿，移液吸头，分装管等都必须预冷后使用。

3. 所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用 70％乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证基质胶呈匀浆状。

4. 溶解时可将基质胶基质置于 4℃冰箱内冰上过夜溶解。成胶后基质胶可以在 4℃ 24－48 小时后重新呈液态。