碧芯生物新品—24重可在Luminex200使用的二代羧基磁性荧光编码微球
时间:2024-04-18 阅读:758
液相悬浮芯片的仪器依据光路不同,存在着两大体系。一种基于普通流式细胞仪检测(也称CBA体系),分群光路为675/780 nm;一种基于Luminex100/200检测,分群光路为658/712 nm。因为分群光路不同,对应这两种体系的荧光编码微球是不能兼容的,即CBA体系的微球不能用采用Luminex体系的仪器读取,而Luminex体系的微球用CBA体系的仪器分群时也不能很好区分。
目前市面上的流式荧光编码微球大多数是基于普通流式细胞仪开发的,碧芯生物也已推出可在普通流式细胞仪上使用的38重磁性荧光编码微球(可根据要求定制更多重)。然而除了Luminex自己公司的微球(也包括BIO-RAD),市面上几乎没有适用于Luminex100/200的磁性荧光编码微球。这主要Luminex公司每群圈出的微球区域荧光分布较窄,即使在两个荧光通道的批间荧光CV高于5%都会出现较严重的偏离,在当前Luminex如此苛刻的设置下,非Luminex厂家制备能在Luminex自身的机器上使用的磁性荧光编码微球的难度甚至比Luminex公司自身生产微球还高,需要对编码荧光精准调控,所以迄今为止尚无任何Luminex公司以外的其他厂家能生产出直接可以在Luminex机器上使用的微球。
碧芯生物基于多年来在荧光编码中积累的成熟技术,摸索了一套制备适应于Luminex200的磁性荧光编码微球的工艺。图1为碧芯生物推出的24重可在Luminex200使用的二代羧基磁性荧光编码微球(其它编码可定制)。这些微球的生产工艺已经成熟,可以规模化生产。
图1 碧芯生物推出的24重可在Luminex200使用的二代羧基磁性荧光编码微球
碧芯生物的二代低吸附磁性微球的质量稳定,性能超越进口Luminex微球。以下是我们从两个方面比较性能的测试结果:
(1)非特异性吸附比较:我们用PE(藻红蛋白)来模拟微球对蛋白的非特异性吸附。从结果中可以看出,碧芯生物的二代羧基磁性荧光编码微球BS-6-10K-COOH- A2对PE的非特异性吸附低。
表1 碧芯生物普通羧基磁性荧光编码微球与低吸附羧基磁性荧光编码微球对藻红蛋白(PE)吸附能力对比
(2)在检测项目中的表现:偶联抗体/抗原后用于项目检测中荧光信号的强弱以及信噪比是衡量微球性能的最重要指标。为了验证几种微球在检测项目中的表现,我们将这上述这几种微球都标记好小鼠抗人VEGF抗体,并做人VEGF检测的标准曲线。检测信号如表1所示。从这些检测结果来看碧芯二代羧基磁性荧光编码微球在检测信号方面也优于进口的两种微球,信号值为Luminex和Bio-Rad微球的2倍多。图2为4种微球做出的标准曲线(五参数拟合)。
图2 五参数拟合四种荧光编码微球做出的检测VEGF的标准曲线。
碧芯生物的二代羧基磁性荧光微球不仅稳定性好(包括热稳定性和编码稳定性),检测性能*,在编码种类上也得到了极大的丰富,可满足各种类型仪器的需求