Age I | Age I | MedChemExpress (MCE)
时间:2024-09-20 阅读:27
Age I
MCE 国际站:Age I
品牌:MedChemExpress (MCE)
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简介:Age I 是经过基因工程重组的快速限制性内切酶,适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。Age I 的同裂酶有:AsiG I,CspA I,BshT I,PinA I。
概述:Age I 是经过基因工程重组的快速限制性内切酶,适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。Age I 的同裂酶有:AsiG I,CspA I,BshT I,PinA I。本产品含通用的 Buffer 和 Color Buffer,其中 Color Buffer 含红色和黄色示踪染料,酶切产物可直接用于凝胶电泳。Color Buffer 的红色染料与 2500 bp 双链DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近;黄色染料与 10 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近。
描述:
• Age II 在 10× 缓冲液 和 10× 显色缓冲液 中 100% 活跃。10× 显色缓冲液包含密度试剂以及红色和黄色示踪染料,可将反应混合物直接加载到凝胶上。在 1% 琼脂糖凝胶中,Color Buffer 的红色染料会随 2500 bp DNA 片段一起迁移,而在 1% 琼脂糖凝胶中,Color Buffer 的黄色染料比 10 bp DNA 片段的迁移速度更快。
• 切割位点:
5'…A▼C C G G T…3'
3'…T G G C C▲A…5'
操作说明:1. DNA 快速酶切流程1.1 在冰上配制反应体系注:若底物 DNA 为 PCR 产物,建议使用经纯化的 PCR 产物。若使用未经纯化的 PCR 产物,可将 10× Buffer 或 10× Color Buffer 减少至 2 μL。1.2 轻轻吸打或轻弹管壁混匀反应液。切勿涡旋。瞬时离心收集挂壁液滴。1.3 对于质粒 DNA,37°C 孵育 15 min;对于 PCR 产物,37°C 孵育 15~30 min;对于基因组 DNA,37°C 孵育 30~60 min。1.4 (可选步骤)80°C 孵育 20 min 可使酶失活,停止反应。1.5 若使用 10× Color Buffer,酶切产物可以直接进行上样电泳。2. 适用于质粒 DNA 的扩大反应体系注:若总反应体系大于 20 μL,可适当增加孵育时间,尽量使用水浴、金属浴或沙浴。
注意事项:1. 若进行双酶切或多酶切,每种快速内切酶的用量为 1 μL,且所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的 1/10。可根据需要适当扩大反应体系。2. 若同时使用的几种快速内切酶的最适反应温度不同,则应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,并在其最适反应温度下进行酶切。3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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