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O-Glycosidase | O-Glycosidase | MedChemExpress

时间:2024-10-08      阅读:35

O-Glycosidase

MCE 国际站:O-Glycosidase

品牌:MedChemExpress (MCE)

存储条件: -20°C,1 年

简介:O-Glycosidase具有高度特异性,可从丝氨酸、苏氨酸残基或者作为糖肽或糖蛋白的一部分释放 Galβ1-3GalNAc。应用于糖蛋白的生物合成分析,O-聚糖的生物活性蛋白质O-糖基化检测和结合位点分析。

概述:O-Glycosidase,大肠杆菌中重组表达,来源于 Streptococcus pneumoniae,具有高度特异性,可催化丝氨酸、苏氨酸残基或糖蛋白去除连接二糖,释放 Galβ 1-3GalNAc。该酶可应用于糖蛋白的生物合成分析,O-聚糖的生物活性蛋白质 O-糖基化检测和结合位点分析。

描述:

O-糖苷酶具有高度特异性,可以从丝氨酸、苏氨酸残基或作为糖肽或糖蛋白的一部分释放出Galβ1-3GalNAc。应用于糖蛋白生物合成分析、O-聚糖生物活性蛋白O-糖基化检测和结合位点分析。


操作说明:1、使用前准备将 O-Glycosidase 试剂取出,加入 30-50 µL ddH2O 溶解,10000 rpm 离心 10 s,确保所有试剂都在管底。其他缓冲液从 -20°C 冰箱中取出待用。2、变性条件下糖蛋白去糖基化1) 用 ddH2O 溶解 1-20 µg 的糖蛋白,加入 1 µL 的 10× Glycoprotein Denaturing Buffer,用 ddH2O 定容至 10 µL,75°C 孵育 10 min。2) 加入 2 µL 的 10× GlycoBuffer 2 和 2 µL 的 10% NP-40,轻轻混匀。3) 加入 1-4 µL 的 O-Glycosidase,加 ddH2O 至 20 µL,轻轻混匀,37°C 孵育 1-4 h。4) 用于 SDS-PAGE 分析或 HPLC 分析。3、非变性条件下糖蛋白去糖基化1) 取 10-100 µg 糖蛋白溶液,加入 2 µL 10× Glyco 缓冲液和 2-5 µL O-Glycosidase,补加 ddH2O 使得反应体系总体积为 20 µL,轻轻混匀。2) 37°C 条件下反应 4-24 h。注:当对天然糖蛋白去糖基化时,建议将等量糖蛋白样品进行变性后再同步进行酶切实验作为阳性对照,以确定非变性条件下去糖基化反应的程度。

注意事项:1. 体系放大时,孵育时间和酶量需要根据实际情况调整,低速震荡混匀可以提高转化率。2. 本产品仅限于专业人员的科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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