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Phi29 DNA Polymerase | Phi29 DNA Polymerase | MedChemExpress (MCE)

时间:2024-10-08      阅读:29

Phi29 DNA Polymerase

MCE 国际站:Phi29 DNA Polymerase

品牌:MedChemExpress (MCE)

存储条件: -20°C,1 年

简介:Phi29 DNA Polymerase是从Bacillus subtilis噬菌体Phi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶。

概述:Phi29 DNA Polymerase是从Bacillus subtilis噬菌体Phi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶,在大肠杆菌表达后经多次纯化分离得到。Phi29 DNA Polymerase具有特殊的链置换活性和高效的连续合成特性,对模板有很强的结合能力,可连续合成多达70kb的DNA片段而不从模板上解离。同时该酶具有很强3´→5´外切酶校正功能,保真性比Taq DNA Polymerase高100倍。

描述:

Phi29 DNA聚合酶具有特殊的链置换活性和高效的连续合成特性,对模板结合能力强,可连续合成长达70kb的DNA片段而不与模板解离。同时该酶具有很强的3´→5´外切酶校正功能,保真度比Taq DNA聚合酶高100倍。


操作说明:测序质粒模板的制备1) 样品处理:在平板上挑取单克隆到10 μL无菌水中,取1 μL进行反应。2) 样品预变性与质粒扩增:按照反应体系,先进行预变性,并使引物与质粒进行退火,加入其它成分后30℃扩增过夜。常用反应体系如下(50 μL体系)3) 扩增效果检测(可选测):将扩增产物稀释后进行琼脂糖凝胶电泳,如存在合适的酶切位点,可进行酶切反应检测。4) 热失活:65℃,10min。5) 测序反应:取上述反应液2 μL加8 μL无菌水,即可用于直接测序。

注意事项:1. 本品灵敏度高,注意防止模板污染。2. Phi29 DNA聚合酶具有强的3´→5´外切酶活性,能够降解引物,扩增反应中应使用经过硫代修饰的随机引物。3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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