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操作步骤
各试剂在使用前平衡至室温。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外,余孔分别加标准溶液或待测样品 100u,注意不要有气泡,轻轻混匀,标板加上盖,37℃反应120分钟。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。
3.每孔加检测溶液 A 工作液 100u,37℃.60分钟。洗板3次,350u/每孔,甩干。
4.每孔加检测溶液B工作液100ul,37℃,60分钟,洗板5次,甩干。5.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色30分钟(此时肉眼可见标准品的前 3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显)。
6.依序每孔加终止溶液 50u,终止反应(此时兰色立转黄色)。用酶联仪在 450nm 波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
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